Chapter15免疫学检测.pdf

苏 莉 Office: 东十一楼#813 E.mail: lisu@hust.edu.cn Chapter 15 免疫学检测与技术 一、概述 主 二、抗原抗体的检测技术 要 三、免疫细胞的检测 内 四、细胞因子及其受体的检测 五、免疫相关基因的检测 容 六、免疫标记技术 一、概述 免疫学检测是应用免疫学理论设计的一 系列测定抗原、抗体、免疫细胞及其分泌 的细胞因子的实验手段及分子生物学技术 在免疫学研究中的应用。 免疫学技术的应用极为广泛, 疾病的诊 断、疗效评价及理论研究等。 二、抗原抗体的检测技术 * 根据反应的基本原理与表现主要分为凝 集反应、沉淀反应和补体参与的各种反应。 * 根据抗原抗体反应设计的试验还有标记 抗原(或抗体)检测相应物质的标记技术。 1. 血清学反应 体外抗原抗体反应中的抗体主要 来源于血清，其检测多以血清为实验 材料，故体外体外抗原抗体反应亦称 为血清学反应（serologic reaction ）。 抗原抗体结合反应的特点 1.特异性 : 抗体分子的CDR与相应抗原决定基互补结合 2. 交叉反应：若两种抗原分子有一个或数个相同的表位，则针对 一种抗原的抗血清可与另一种抗原发生反应。 3. 可见性 ：当抗原抗体比例、电解质浓度合适时、抗原与抗体 结合会产生明显的反应物（凝集物或沉淀物）。 4. 可逆性 ：抗原与抗体的结合为非共价键互补结合，在一定的 条件下，结合是稳定的，当条件改变时，如低pH、高盐浓度、 低温等，可以发生解离，解离后的抗原或抗体仍保持原有的性 质。 2. 经典血清学反应的类型 类型 抗原 抗体 辅助物 敏感度（g抗体氮） 凝集反应 颗粒性 凝集素 0.01 沉淀反应 可溶性 沉淀素 5-10 溶血（菌） 红细胞 溶血素 补体 0.001-0.3 反应 G-细菌 溶菌素 补体 （同上） 补体结合 固定补 补体 反应 体抗体 SRBC 溶血素 0.1 中和反应 外毒素 抗毒素 靶细胞 0.01 病毒 中和抗体 靶细胞 （同上） 自 1 身 ) 红 凝 1/2 细 1/4 胞 集 凝 1/8 集 反 1/16 反 应 应 1/32