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002实验二植物离体根的培养
实验二 植物离体根的培养 二、实验目的 掌握植物根系培养的方法 掌握无菌操作技术 二、实验原理: 根是植物的营养器官。 离体根培养是进行根系生理和代谢研究的最优良的实验体系,因为根系生长快,代谢强,变异小,加上无菌,不受微生物的干扰,并能根据研究需要,改变培养的成分来研究其营养吸收、生长和代谢的变化。 另一方面,由根细胞可再生成植株,不仅证明根细胞的全能性,而且也能产生无性繁殖系,用于生产实践。 三、实验用品 1 .培养基:胡萝贮藏根:MS+2.0mg/L 2 4-D 2 .材料:本实验以胡萝卜贮藏根 3 .消毒药品:用75%乙醇;10%次氯酸钠 4.接种工具的准备:镊子(长)、剪刀、酒精灯 手术刀片 5.培养容器的准备:三角瓶 6 .组培室配套设备等 四 胡萝卜根的组织培养 1 将准备好的胡萝卜在无菌水中冲洗数次、淋干,紫外灭菌30 min 2 取两个50ml的小烧杯,分别倒入少许的70%的酒精和10%的次氯酸钠。 3 取胡萝卜贮藏根,洗净,然后将胡萝卜根于70%酒精中浸泡30-60s 4 浸于10%的次氯酸钠液中消毒灭菌8 min后,再用无菌水冲洗3—4次。 5 将灭菌材料放在灭菌的滤纸上,吸干水分。 6 用解剖刀将胡萝卜切去表皮和中柱,取皮层,切成0.5cm见方的小块,接种于MS附加 2.0mg/L 2,4-D 培养基内,于 25℃,黑暗或漫射光下培养,14—21 天后继代一次。 五观察及继代培养 一周后观察 14—21 天后继代一次 六 思考讨论 1 离体根培养的注意事项 2 哪些植物最适合做离体根培养 * *
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