家蚕丝腺蛋白质组学研究方法的建立.pdf

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’( )! *’ ) # 年 月 !$$% # !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 +,-.,/0 !$$% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 家蚕丝腺蛋白质组学研究方法的建立 ! #$%’()$*+,%,- .,%*/-$ /0 1,$,23*)4 5)(6 7(- /0 （ ） 5)(68/2+ !#$% #’( 9 : 8)%* ;2/%,/+)3$ 刘鸿丽，夏庆友 ，侯 勇，赵 萍，邹 勇 官 建 ， ， ， ， WXY Z’-DRW4 [X: \4-DR]’. ZKY ]’-D ^Z:K O4-D ^KY ]’-D ,-6 _Y:* +4,- 西南大学农业部蚕学重点开放实验室，重庆 J$$%#9 ， ， ， 3% 4%2 5%*#0),/)*+, 6+7(*+/(*2 (- 81*#0),/)*+, 9#$#/*2 5()/:%/ ;$#%*#/2 !($1=#$1 J$$%#9 !#$+ 摘 要 通过高精度的双向电泳技术对家蚕中部丝腺组织的蛋白质进行分离，采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 （ ， ）对其中一些表达量较高的蛋白点进行鉴 F,/4TR,@@4@26 (,@2/ 62@’/;4’-‘ 4’-4a,4’- 4F2 ’E E(4D? F,@@ @;23/’F2/0 7:WbXRKHR7G 定，并利用 （ ）软件结合家蚕基因组预测的蛋白质数据库构建本地的肽质量指纹 _O7:c _2-2/,( O/’24-d 7,@@ :-,(0@4@ E’/ c4-6’A@ 图谱数据库，对所得到的肽质量指纹图谱进行分析。研究发现，经过双向凝胶电泳及其图象分析技术，硝酸银染色和考马斯 亮蓝染色分别能分离出 个以上和 个以上的蛋白点。这些蛋白质点主要集中在分子量 区域，等电点 L$$ #$$ #L e 8$Bb ;Z fL e 之间。 鉴定的 个考染蛋白点中有 以上的 （ ）的信号峰较强。在数据库检索 % 7:WbXRKHR7G !L 9$ g O7H O2;462 7,@@ H4-D2/;/4- 过程中，利用家蚕肽质量指纹数据库所得检索结果与在7,@3’ 的检索结果相比，前者不仅能够准确鉴定出一些已有研究报道 的蛋白，从而验证检索方法的可行性，而且还能够对一些已经被家蚕基因组数据库所预测但未曾报道的新蛋白质进行鉴定， 从而建立了一整套适合于家蚕蛋白质组研究的方法，并为其它绢丝昆虫蛋白质组研究提供了重要参考。 关键词 中部丝腺，双向电泳， ， 7:WbXRKHR7G _O7:c 中图分类号