C0016 乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒说明书.pdfVIP

乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒 产品编号 产品名称 包装 C0016 乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒 100次 产品简介：  碧云天的乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit) ，也称乳酸脱氢酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱 氢酶释放检测试剂盒(LDH Release Assay Kit)，是一种基于diaphorase催化的INT显色反应，通过比色法检测细胞毒性时释放 的乳酸脱氢酶活性或检测其它样品中的乳酸脱氢酶活性的试剂盒。  本试剂盒可以用于常规的乳酸脱氢酶活性的检测，更常用于以LDH释放为指标的细胞毒性检测。同时，基于细胞总乳酸脱 氢酶活性的检测，本试剂盒也可以用于检测细胞增殖和细胞毒性检测。  细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的破坏会导致细胞浆内的酶释放到培养液里，其中包括酶活性较为稳定的乳酸脱氢酶 (lactate dehydrogenase, LDH) 。通过检测从质膜破裂的细胞中释放到培养液中的LDH 的活性，就可以实现对细胞毒性的定量 51 分析。LDH释放被看做细胞膜完整性的重要指标，并被广泛用于细胞毒性检测。LDH释放被认为是以前使用放射性的 Cr 51 标记细胞，随后通过 Cr释放进行细胞膜完整性检测的安全有效的替代方法。 +  本试剂盒的基本原理是，在乳酸脱氢酶的作用下，NAD 被还原生成NADH ，NADH 和INT (2-p -iodophenyl-3-nitrophenyl + tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脱氢酶(diaphorase)催化反应生成NAD 和强生色物甲臜(formazan)，在490nm波长下产生吸收 峰，从而可以通过比色来定量乳酸脱氢酶的活性。吸光度与乳酸脱氢酶活性成线性正相关。该酶联反应原理的示意图如下：  可检测细胞培养液、细胞裂解液等样品中乳酸脱氢酶的活性。一个试剂盒可进行100次检测。 包装清单： 产品编号 产品名称 包装 C0016-1 LDH释放试剂 1.5ml C0016-2 乳酸溶液 2ml C0016-3 酶溶液 1ml×2 C0016-4 INT溶液(10X) 0.2ml C0016-5 INT稀释液 2ml － 说明书 1份 保存条件： -20 ℃保存，一年有效。C0016-3需注意避免反复冻融。C0016-4需避光保存。试剂盒解冻后可以短期4 ℃存放，2-3天内有效。 注意事项：  冷冻会使样品中部分乳酸脱氢酶失活，4 ℃可放置2-3天。建议样品准备好后尽量当天完成测定。  如果检测细胞培养液中的乳酸脱氢酶，由于血清含有乳酸脱氢酶，建议血清的使用浓度不要超过1%，并最好使用热灭活血 清。如果一定需要使用10%血清，在检测时一定要设置没有细胞，但加入了相同体积培养液的对照孔，以用于消除背景。  细胞过度生长、密度过高、离心速度过大、培养箱内外温差过大，都会造成细胞释放乳酸脱氢酶增加。  如果希望进行乳酸脱氢酶活性的绝对定量，用户需自备乳酸脱氢酶标准品。  为了您的安全和健康