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08–环境因素对微生物影响
环境因素对微生物的影响 微生物学实验 一、实验目的 了解各种物理、化学和生物因素对微生物生长的抑制作用 观察各因素对微生物生长抑制的强弱 二、实验原理 环境因素包括物理因素、化学因素和生物因素。不良的环境条件使微生物的生长受到抑制,甚至导致菌体的死亡。但是某些微生物产生的芽孢,对恶劣的环境条件有较强的抵抗能力。我们可以通过控制环境条件,使有害微生物的生长繁殖受到抑制,甚至被杀死;而对有益微生物,通过调节理化因素,使其得到良好的生长繁殖或产生有经济价值的代谢产物。 温度是影响微生物生长的重要因素之一。根据微生物生长的最适温度范围,可分为高温菌、中温菌和低温菌,自然界中绝大部分微生物属于中温菌。 紫外线主要作用于细胞内的DNA,轻则使微生物发生突变,重则造成微生物死亡。紫外线照射的剂量与所用紫外光灯的功率(瓦数)、照射距离和照射时间有关。紫外线透过物质的能力弱,一层厚纸足以挡住紫外线的通过。 (一)物理因素 氧气 根据微生物对氧气的需求,可把微生物分为好氧菌、厌氧菌和兼性好氧菌。在鉴定细菌时,常以它们的好氧性作为指标。 紫外线主要作用于细胞内的DNA,轻则使微生物发生突变,重则造成微生物死亡。紫外线照射的剂量与所用紫外光灯的功率(瓦数)、照射距离和照射时间有关。紫外线透过物质的能力弱,一层厚纸足以挡住紫外线的通过。 (一)物理因素 抑制或杀死微生物的化学因素种类很多,用途广泛,性质各异。其中表面消毒剂和化学药剂最为常见。表面消毒剂在极低浓度时,常常表现为对微生物细胞的刺激作用,随着浓度的逐渐增加,就相继出现抑菌和杀菌作用,对一切活细胞都表现活性。化学药剂主要包括一些抗代谢物,例如抗生素、蛋白变性剂等。 pH值的变化也对微生物生长有很大影响。 (二)化学因素 青霉菌、放线菌和某些细菌产生的抗生素(如青霉素、链霉素等)对微生物存在抑制和致死作用。抗生素抑菌、杀菌机制各有不同,如青霉素类能阻碍细胞壁合成,链霉素通过与核糖体30S小亚基结合抑制蛋白质合成,放线菌素D阻断RNA的合成。不同种类微生物对抗生素的耐受性存在差异。 (三)生物因素 三、实验器材 菌种 大肠杆菌、金黄葡、枯草杆菌、产黄青霉 培养基 牛肉膏蛋白胨培养基、豆芽汁培养基 器材 平皿、吸管、酒精灯、牛皮纸、滤纸片 试剂 10%苯酚、5%来苏尔、1:20 新洁尔灭溶液、无菌水 仪器 水浴锅、紫外灯 四、实验步骤 化学因素1、取0.1ml金黄色葡萄球菌菌液于无菌空皿中,注入融化的牛肉膏蛋白胨培养基,摇匀待凝。作2板重复。2、用记号笔在皿底划出四等分区块,每个区块内分别放上浸有10%苯酚、 5%来苏尔、1:20 新洁尔灭溶液及无菌水的小滤纸片,作上标记。3、倒置于37℃培养箱培养24小时 抑菌透明圈 生物因素1、制豆芽汁平板1块2、从斜面分别挑取青霉、大肠杆菌、枯草杆菌和金葡在平板表面划线,方法如图。3、倒置于37℃培养箱培养24小时 产黄青霉 测试菌 大肠杆菌 枯草杆菌 金葡菌 物理因素 紫外线1、制板:取0.1ml金黄色葡萄球菌菌液于无菌空皿中,注入融化的牛肉膏蛋白胨培养基,摇匀待凝。作2板重复。 2、紫外线处理 :打开培养皿盖,用无菌的三角形牛皮纸遮盖部分平板。在无菌操作台上用紫外灯照射20?min,取去黑纸,盖上皿盖。 3、培养 :在37℃培养箱中倒置培养24小时 五、实验结果 测定各种化学物质形成的抑菌圈的大小,比较不同化学试剂的抑菌能力? 观察紫外线对微生物生长的影响。 比较青霉素对不同微生物生长的影响(记录细菌生长相对长短)。 六、问题与讨论 请列举5种化学因素和两种物理因素对微生物生长的抑制作用及其机理。 你如何确定某一种理化因素是抑菌,杀菌或是溶菌? 本次实验课结束时请确保实验台收拾干净,并清洗培养皿、试管、三角瓶、吸管!下周实验请预习: 微生物计数与大小测量 芽孢和荚膜染色
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