第十三章+免疫学技术概论精要.ppt

[目的与要求] 1、了解必威体育精装版的免疫学诊断技术以及细胞免疫技术的种类与用途； 2、掌握常用的免疫血清学技术及其实验原理、影响因素； 3、掌握生物技术公司常用的免疫制备技术； 4、了解免疫学技术的应用及其发展趋向。 [难点与重点] 重点：常用的免疫血清学技术及其实验原理、影响因素；生物技术公司常用的免疫制备技术。 难点：常用的免疫血清学技术及其实验原理、影响因素。 激光共聚焦显微镜 细胞免疫技术的特点： （1）方法复杂，根据不同检测对象需采用不同的方法，这也是细胞免疫技术发展不快的原因； （2）目前逐渐发展用血清学方法检测细胞免疫，如用单克隆抗体检测CD抗原进行T细胞亚群分析，血清学反应测定白细胞介素和干扰素等，即细胞免疫技术与血清学技术融为一体。 细胞免疫技术的特点： 此外，近年来各种先进的检测仪器应用于细胞免疫技术，如流式细胞仪(flowcytometer)、激光共聚焦显微镜等，使免疫细胞表面分子的检测、定位及其功能的研究有了较大的发展。 第3节 免疫制备技术的种类 免疫制备技术是指制备与免疫检测有关制剂的各种技术，包括抗原制备、抗体制备、抗体纯化及抗体标记等技术。 第4节 免疫学技术的应用 一、动物疫病诊断 用免疫血清学方法对动物传染病、寄生虫病等进行诊断，是免疫学技术最突出的应用。应用免疫血清学技术可以检测病原微生物抗原或抗体，其中酶标抗体技术，已成为动物多种传染病的常规诊断方法，其简便、快速，又具有高度的敏感性、特异性和可重复性，已有许多商品化的酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断试剂盒。 二、动植物生理活动研究 动物、植物体中存在一些活性物质，如激素、维生素等，它们在体内含量极微少，但在调节机体的生理活动中起重要作用，因此可通过分析测定这些生物活性物质的含量及变化来研究机体的各种生理功能(如生长、生殖等)。由于这些物质含量极低，用常规检测方法不能准确测出。 二、动植物生理活动研究 目前放射免疫测定和酶免疫技术已能精确测出ng(10-9g)及pg(10-12g)级水平的物质，它们已成为测定动物、植物、以及昆虫体内微量激素及其他活性物质、植物生理和生物防治的重要技术手段。 三、物种及微生物鉴定 各种生物之间的差异都可表现在抗原性的不同，物种种源越远，抗原性差异越大，因此可用区分抗原性的血清学反应进行物种鉴定与物种的分类等工作。血清学反应在细菌、病毒等微生物鉴定和血清型及亚型的分析方面已得到广泛应用。但在动物种源、植物和昆虫分类方面还是一个新领域。 四、动植物性状的免疫标记 通过分析动物、植物一些优良性状(如高产、优质、抗逆性等)的特异性抗原，然后用血清学方法进行标记选择育种，是一个很有前途的方向，它比分子遗传标记选择育种简便。 五、生物制品研究 生物制品(如疫苗、诊断制品、免疫增强剂等)的研究与开发，免疫学技术是必不可少的支撑技术。疫苗研究中需用血清学技术和细胞免疫技术作为免疫效力的评价手段。在研究一些免疫增强药物，尤其研究抗肿瘤药物时，需用细胞免疫技术分析测定它们对机体细胞免疫功能的增强作用。 六、动物疫病致病机理研究 动物传染病的病原从机体特定部位感染，并在特定组织细胞内增殖，引起致病。采用免疫荧光抗体染色或免疫酶组化染色技术，可在细胞水平上确定病毒等病原微生物的感染细胞，还可用免疫电镜技术等，在亚细胞水平上进行抗原的定位。免疫学技术还可用于研究自身免疫病和变态反应性疾病的发病机理。 * 第十三章 免疫学技术概述 免疫学技术是指利用免疫反应的特异性原理，建立各种检测与分析技术以及建立这些技术的各种制备方法，包括： ①用于抗原或抗体检测的体外免疫反应技术，或称免疫检测技术，这类技术一般都需要血清进行试验，故又称为免疫血清学反应或免疫血清学技术； ②用于研究机体细胞免疫功能与状态的细胞免疫技术； ③用于建立免疫检测方法的免疫制备技术，如抗体或抗原的纯化技术、抗体的标记技术。 E-玫瑰花环实验 正常人外周血中T细胞在体外能直接和绵羊红细胞(SRBC)结合形成玫瑰花样细胞团。这是因为人的T细胞膜上具有能和SRBC膜上的糖蛋白相结合的受体，称为E受体。已证实E受体是人T细胞所特有的表面标志，因此本试验可作为人外周血T细胞的鉴定和计数，同时作为人细胞免疫功能状态的一个检测指标，也是分离T细胞的常用方法之一。 免疫标记技术 第1节 免疫血清学技术概述 抗原与相应抗体在体内和体外均能发生特异性结合反应，因抗体主要来自血清，因此在体外进行的抗原抗体反应称为血清学反应或免疫血清学技术