兽药30天和90天喂养试验指导原则.pdfVIP

兽药30 天和90 天喂养试验指导原则 一、概述 （一）定义与目的 当评价某受试药物的毒作用特点时，在了解受试药物的纯度、溶解特性、稳 定性等理化性质和有关毒性的初步资料之后，可进行30天或90天喂养试验，以提 出较长期喂饲不同剂量的受试药物对动物引起有害效应的剂量、毒作用性质和靶 器官，估计亚慢性摄入的危险性。90天喂养试验所确定的最大未观察到有害作用 剂量可为慢性试验的剂量选择和观察指标提供依据。 为了确保30天或90天喂养试验结果的真实性、可靠性和可追溯性，根据新兽 药研究的规律，结合国内兽药毒理学评价的实际情况制定了本指导原则。 （二）适用范围 本指导原则适用于评价兽用化学药品、中兽药、消毒剂及饲料药物添加剂对 动物引起的有害效应。 二、试验设计 （一）材料与方法 1.实验动物 选择啮齿类动物大鼠。为了观察受试药物对动物生长发育的影响，使用雌、 雄两种性别的离乳大鼠（出生后4 周）。试验开始时动物体重的差异应不超过平 均体重的士20 ％。 2.试剂 （1）哺乳动物血球计数配套试剂。 （2 ）血液生化学指标测定配套试剂。 （3 ）组织标本固定用试剂 （4 ）组织病理学检查常用试剂 3.主要仪器 （1）生物显微镜 （2 ）全自动生化分析仪 （3 ）血球计数仪 （4 ）组织病理学检查常用仪器设备 （二）试验步骤 1.剂量组设计 设3～5 个剂量组和一个对照组。剂量选择高剂量组的动物在喂饲受试药物 期间应当出现明显的中毒症状但不造成死亡或严重损害；低剂量组不引起毒性作 用，从而估计或确定出最大未观察到有害作用剂量；在高剂量和低剂量之间再设 1～3 个剂量组，以期获得比较明确的剂量-反应关系。 剂量的设计可参考以下原则： （1）以LD50 10 ％～25 ％为30d 或90d 喂养试验的最高剂量组，此LD50 百 分比的选择主要参考LD50 剂量反应曲线的斜率。然后在此剂量下设几个剂量组。 最低剂量不能低于靶动物可能摄入量的3 倍。 （2 ）对于求不出LD50 的受试药物：30 天喂养试验应尽可能涵盖靶动物可 能摄入量100 倍的剂量。对于靶动物摄入量较大的受试药物，高剂量组可以按最 大耐受剂量设计。90 天喂养试验根据30 天喂养试验结果确定剂量，或者以靶动 物的可能摄入量的 100～300 倍作为最大未观察到有害作用剂量，然后在此剂量 以上设几个剂量组，必要时亦可在此剂量以下增设剂量组。 每个剂量组至少20 只动物，雌、雄各半。如果在试验间期要处死实验动物 进行检查，则需适当增加各组动物数。 2.试验动物标记称重、标记编号和分组 试验前购置离乳大鼠（出生后4 周），雌、雄各半，饲养观察3～5 天。分 别选择健康雌、雄大鼠进行称重和标记编号，采用完全随机法，将其分为4～6 组，每组两种性别大鼠均不得低于10 只。 3.给药方案 首选将受试药物混入饲料中喂养（注意受试药物在饲料中的稳定性）。如有 困难，也可加入饮水中或灌胃。 当受试药物混入饲料时，需将受试药物给予剂量，按大鼠每日饲料摄入量折 算为饲料中受试药物浓度（mg/kg ），30天喂养试验大鼠每日饲料摄入量按体重 的10%折算，90天喂养试验大鼠每日饲料摄入量按体重的8%折算。 饮水给予受试药物时，动物每日饮水量按体重的15～20%计算。 灌胃时，大鼠灌胃量按1mL/ （100g体重· 日）计算。每天灌胃的时间点也应 一致。 4.试验观察 试验期间，每天观察记录动物的一般行为表现、中毒及死亡情况；并同时记 录大鼠饮水投入量和饮水剩余量；按周时间段测量记录实验大鼠体重、投入饲料 量及剩余饲料量。 5.检测 （1）血液学指标 必测血液学指标包括血红蛋白（Hg ），红细胞计数（Ec ），白细胞计数（Lc ） 及嗜中性（NL ）、嗜酸性（AL ）、嗜碱性（BL ）、淋巴（LM ）、单核（ML ） 的分类计数等，必要时增加测定血小板数（Pl ）和网织红细胞数（Rc ）。30天喂 养试验一般于试验结束时测定一次，90天喂养试验一般于试验中期和结束时各测 定一次。各组不少于10只大