分子标记技术概述(上).pdf

维普资讯 专 专 Spec~ logicI~evie,s 分子标记技术概述 ★ 张海英 许 勇 王汞健 摘 要：对 目前常用的几种分子标记技术 (RFLP、RAPD、SSR、SCAR、STS、AFLP等)的原理与应用进行 了综述 并对分子标记技术 的发展趋势进行了预测。 关键词：分子标记 技术 概述 分子标记是指 生物大分子的多态性为基础 的 1984)等，利用酶鉴定技术进行遗传分析就比较困难 遗传标记。分子标记技术的出现 ，使植物育种中的 “间 需要寻找新的分子标记技术 (Nielson，19851— 接选择”成为可能，太大提高了遗传分析的准确性和选 2DNA分子标记 育种的有效性，因而在遗传育种领域愈来愈受到重视， DNA分子标记是指电泳后能r』一定的方法检测 将二者有机结 台是今后育种工作 的趋势。 到的反映基 因组某种变异特征 的DNA片段 这种 广义的分子标记包括两类，即：同工酶标记和 DNA片段可 以通过 限制性 内切酶切割 、PCR扩增或两 DNA标记 ，狭义的分子标记仅指DNA标记。 者结台来获得。因此，DNA标记主要包括 ：大类 ： 1同工酶标记 第一大类是基于 DNA分子杂交 的方法 主要指 自70年代 以来 ，同工酶作 为一种直接的基因产 限制性 片段 妊度多态性 IRestrictionfragmentlength 物，在作物遗传育种中得到了广泛的应用：相对于形 polymorphism，简称 RFLP)； 态性状标记 它具有一些独特的优点。首先它受环境 第二大类是基于PCR(PolymeraseChainReactionJ 因素影响较小 ，表现 出相对的稳定性 ；其次多种同工 技术的DNA扩增方法 。它叉分为二娄 ， 是任用随 酶可 以在种子或幼苗 中表达 ，有利于进行早期鉴定 机引物 (Arbitraryprimer)进行扩增 ，主要指随机扩增 (TanksleyandOrton．1983)= 多态 性 DNA技 术 (Random amplified po1)mlorphic 物种间的同工酶差异主要 由决定酶蛋 白本身的 DNA，简称 RAPD)；另一类标记是采用特定引物或引 等位基因或非等位基因的不同造成，因此只要酶的变 物 对 扩 增 的 标 记 ． 主 要 有 SCARfSequence 异上存在明显的差异 ，就可以对同一物种 内不同种 、 eharasterized amplifiedregion)，STS(Sequencetagged 变种、品种、品系问的遗传差异进行有效检测，从而确 site)，小卫星 DNA(MinisatelliteDNA)：傲卫星 DNA 定它们彼此之间的亲缘关系。通过比较不同同工酶酶 (Microsatellite DNA)．叉 称 简 单 重 复 系 列 (Simple 谱带型的差异，对许多蔬菜作物的亲缘进化关系如西 sequence repeat， 简 称 SSR}；ISSR I『nter simple 瓜 (Zamiretal，1984)、马铃薯 (Oliveretal 1985： , ~eqllerleerepeat)等一其中STS和 SCAR属于位点特 Douches，1991)、萝 (陈惠 明．1990)、大 白菜 (郑 晓 异的PCR标记方法．其它则属于多位点标记方法．检 鹰 ．1997)等进行了研究： 测 的区域均与微卫星序列