VCS技术.ppt

白细胞五分类VCS技术 从三分群到五分类 三分群： 小细胞群 中间细胞群 粒细胞群 五分类： 淋巴细胞 单核细胞 中性粒细胞 嗜酸细胞 嗜碱细胞 五分类VCS技术 运用V、C、S三种探针,在流式通道的某一位点,对通过的单列白细胞，进行逐个的、同时的、三重的检测，以及三维分析,以确定其亚群性质。 V-低频波，分析细胞体积； C-高频波，分析细胞核型； S-激光，分析细胞的颗粒特性。 白细胞接近原态的分析 Scatter Pak双试剂系统的作用 溶血剂(E-lyse): 溶解红细胞 终止剂(S-lyse): 令溶解作用停止，并使白细胞恢复到“接近原态” 接近原态的WBC分析 流体动力聚焦 流体动力聚焦的流式通道 单细胞流在鞘液的包裹下呈最适排列通过流式通道 将重叠限制到最低限度 VCS检测 增强型流式通道 体积检测(V) 细胞内部结构检测(C) 细胞颗粒特性检测(S) 三维分析技术 将检测过的8,192个细胞分布到一个以V、C、S为三维坐标的空间内，显示出细胞群特征。 高智能的计算机软件分析分析细胞群的位置、相对密度、轮廓、和大小。 三维坐标的数据分析位点多过 16 × 106个。 细胞的三维分析 三维细胞定位 VCS三维分析的技术特点 接近原态的白细胞分析 一个分类试剂包 增强型流式通道，VCS直接、同时、三重检测 分析细胞的视角与手工相似 真正的三维检测 VCS，汇集最全面的物理检测工具 三维分析的高分辨率 (256 ? 256 ? 256) 白细胞五项分类 10多种异常细胞的检测 网织红细胞的检测 网织红细胞是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的不成熟红细胞,通常较成熟红细胞稍大,其胞质中尚残存部分嗜碱性物质(RNA,核糖体),经碱性染料染色后可见深染的网状结构,故名。 右图中标记A、B、C的细胞分别代表不同成熟度的网织红细胞的。 新亚甲蓝-VCS检测法 以经典的超活染料新亚甲蓝（NMB）着色网织红细胞内残存的RNA。 漂去除红细胞内血红蛋白(酸性试剂) 在流式通道，运用VCS三维技术，将网织红细胞与成熟红细胞、白细胞、血小板、和有核红细胞区分开来。 网织红细胞的VCS三维分析 运用VCS三维技术分析染色后的红细胞。 低频波检测细胞体积 高频波(阻光性)检测细胞的内部成分，可剔除非红细胞颗粒 激光散射将网织红细胞与成熟红细胞区分开来(网织红细胞胞浆含较 RNA 物质，散射较多的激光，在散点图上分布于红细胞的右侧)。 网织红细胞成熟度越差,在散点图上分布越靠右 检测与白细胞分类共享一个流式通道。 网织红细胞VCS三维散点图分析 网织红细胞参数意义 参数 英文 正常参考 网织红细胞百分比 RET% 0.5% - 2% (成人) 2% - 6% (新生儿) 网织红细胞绝对值 RET# (25 – 75) ×109/L 网织红不成熟度 IRF 0.2-0.4 平均网织红体积 MRV 100-125fl 平均球形细胞体积 MSCV 84-100fl 高散射网织红百分比 HLR% 0.07%-0.7% 高散射网织红绝对值 HLR# (3 – 50) ×106/L * * Lymphocyte Monocyte Granulocyte 小细胞35-90fl 单个核细胞90-160fl 粒细胞160-450fl 淋巴 嗜碱 单核 嗜酸 中性粒细胞 接近原态的白细胞 进入流式通道 正常压力差：标本压力大于鞘流压力 异常压力差I 异常压力差II 八千多个白细胞逐个、直接、同时地在流式通道内接受VCS三重检测，得到各自的三维座标值 V C S VCS增强型流式通道运用三种独立的能量探针来分析细胞,是目前最全面先进的分析工具 V 是以库尔特原理检测细胞的体积 获得的是完全的细胞体积 VCS - DC C 运用高频探针检测细胞的内部结构 获得细胞核复杂程度的信息 区分分叶核和非分叶核细胞 VCS - RF VCS - La