04检测生物组织中还原糖脂肪蛋白质.doc

专题一 细胞的分子组成 课题四 检测生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质 【考点导航】 1．检测生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质A 【实验案例】 1．检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质 实验原理：还原糖 脂肪 蛋白质 方法步骤： ①可溶性还原糖的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 1. 制备组织样液。 （去皮、切块、研磨、过滤） 苹果或梨组织液必须临时制备。 色浅、含量高 因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。 2. 取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。 3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂，振荡。 应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂； 切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。 斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu(OH)2在70~900C下分解成黑色CuO和水； 甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无Cu(OH)2生成。 4. 试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜色：浅蓝色 → 棕色 → 砖红色（沉淀） 最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者。 也可用酒精灯对试管直接加热。 防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤； 缩短实验时间。 ②脂肪的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。 干种子要浸泡3~4小时，新花生的浸泡时间可缩短。 因为浸泡时间短，不易切片，浸泡时间过长，组织较软，切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。 在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，染色1分钟。 染色时间不宜过长。 用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。 酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。 用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片。 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。 低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。 装片不宜久放。 时间一长，油滴会溶解在乙醇中。 ③蛋白质的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 制备组织样液。 （浸泡、去皮研磨、过滤。） 黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。 鉴定。加样液约2ml于试管中，加入双缩脲试剂A，摇匀；再加入双缩脲试剂B液3~4滴，摇匀，溶液变紫色。 A液和B液也要分开配制，储存。鉴定时先加A液后加B液。 CuSO4溶液不能多加。 先加NaOH溶液，为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入，会导致Cu2+变成Cu(OH)2沉淀，而失效。 否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。 可用蛋清代替豆浆。 蛋清要先稀释。 如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。 附：淀粉的检测和观察 用试管取2ml待测组织样液，向试管内滴加2滴碘液，观察颜色变化。 碘液不要滴太多 以免影响颜色观察 【巩固练习】 1．下面是四位同学的实验操作方法或结果，其中错误的一项是 ( ) A．番茄汁中也含有丰富的葡萄糖和果糖，可用作还原糖鉴定的替代材料 B．用纸层析法分离叶绿体中的色素，扩散最快的一条色素带呈橙黄色 C．蛋白质与双缩脲试剂作用产生紫色反应 D．显微镜下观察根尖的有丝分裂，在细胞呈现正方形的区域易找到分裂期的细胞 2．不同的有机物与某些物质反应有特殊的显色反应，实验中常以此来鉴定不同的有机物。肾小球肾炎病人常伴随水肿，其尿液（　　） A．与二苯胺反应呈蓝色 B．与斐林试剂反应呈砖红色 C．与苏丹Ⅲ反应呈橘黄色 D．与双缩脲试剂反应呈紫色 3．下列关于实验的描述中正确的一组是 ( ) ①斐林试剂加入到蔗糖溶液中，加热后出现砖红色沉淀 ②脂肪的鉴定需用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴 ③鉴定还原糖时，要先加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液 ④蛋白质用双缩脲试剂鉴定呈紫色 ⑤洋葱根尖装片制作的步骤是解离、漂洗、染色、制片 ⑥观察洋葱根尖装片发现最多的细胞是前期