15生物科学“微生物学”实验教学大纲.docVIP

微生物学实验教学大纲课程：：本课程是，与理论课紧密结合，是生物技术专业的专业基础课程之一能进行独立的实验操作，促进学生创意识的形成和综合素质的提高目标学会培养基的制备灭菌为达到上述目标，要求学生一定要自己亲自动手独立实验，实事求是的完成每一次实验报告，并做好每次实验前的预习实验报告成绩考核成绩各占课程总成绩的50％实验报告注重考察学生实验的主动性、分析问题和解决问题的能力。要求学生在实验报告中写清楚实验目的、原理、实验材料、实验步骤、实验结果分析等内容考核实验的基本操作内容由学生抽选项在规定时间内完成序号 项目名称 实验 实验 微生物培养基的制备、灭菌技术 必 人体表面与实验室环境的微生物检查 专业 基础 综合必修 3 细菌、霉菌、酵母菌的简单染色观察 专业 基础 综合 必修 4 革兰氏染色必修 5 土壤中微生物的分离及简单鉴定 专业 基础 综合 必修 9 1 本科 6 微生物显微直接计数、悬滴观察及大小测定 专业 基础 综合 必修 3 1 本科 7 微生物菌种制作 专业 综合 1 本科 8 水中细菌总数和总大肠菌群的检测 专业 设计 必修 9 IMViC试验 基础 综合 必修 3 1 本科 10 110690010* 牛乳的巴氏消毒、细菌学检查及酸乳制作 专业 设计 必修 9 1 本科 五、实验内容 实验一：培养基制备、灭菌及环境消毒 （一）教学目标 1、熟悉微生物对营养的要求，初步掌握培养基配制的原理和方法。 2、熟悉高压蒸气灭菌的原理，初步掌握高压蒸气灭菌器的使用方法。 3、实验室环境消毒原理及方法。 （二）实验器材 1、器具 （1）仪器 高压蒸气灭菌器，微波炉，光波炉，培养基分液器，pH计，电子天平，粗天平，喷雾器等。 （2）其它物品 18×180mm试管，250mL三角烧瓶，500mL烧杯，500mL量筒，1000mL量筒，90mm培养皿，漏斗架，漏斗，止水夹，橡皮管，玻棒，角匙等。 （3）耗材 pH试纸、棉花、纱布、棉线、标签纸、橡皮筋、牛皮纸等。 2、药品 牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、可溶性淀粉、鲜马铃薯、琼脂粉、孟加拉红、乙醇95%、NaCl、HCl、NaOH，KNO3、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O、KH2PO4、K2HPO4·3H2O、FeSO4·7H2O等。 （三）实验内容 1、牛肉膏蛋白胨琼脂（基础）培养基制备 2、高氏1号培养基配制 3、马丁氏培养基制备 4、PDA培养基配制 5、棉塞的制作 6、高压灭菌器的使用方法 （1）立式高压灭菌器的使用 （2）手提式高压灭菌器的使用 7、实验室空气、地板和实验台消毒 （1）实验室空气消毒 （2）实验室地板消毒 （3）实验台消毒 实验二：实验室环境和人体表面的微生物检查及无菌操作技术 （一）教学目标 1、学习和证实实验室环境与人体表存在微生物的方法和技术；区别不同类群微生物的菌落形态特征；体会人们无时不生活在微生物的海洋中。 2、初步掌握放线菌插片培养方法。 3、初步掌握微生物的分离技术、转管培养技术和大型真菌的组织分离方法。 4、掌握实验室常用保藏菌种的方法。 5、体会无菌操作的重要性，养成无菌的概念。 （二）实验器材 1、器具 （1）仪器 电子天平，高压灭菌锅，恒温水浴锅，超净工作台，恒温培养箱，微波炉，光波炉等。 （2）其它物品 厌氧管，无菌培养皿，接种环，剪刀，镊子，试管架，酒精灯等。 （3）培养基 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，牛肉膏蛋白胨琼脂培养基斜面，PDA培养基斜面，马丁氏培养基斜面，高氏1号培养基，高氏1号培养基斜面。 （4）菌种 天蓝色链霉菌（Streptomyces coelicolo），金色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）,猴头（Hericium erinaceus），灰树花（Grifola frondosa），杏鲍菇（Pleurotus eryngii）等。 （5）其它耗材 香菇（Lentinus edodes）等食药用大型真菌子实体，无菌棉签，无菌水，工业酒精，标签纸等。 （三）实验内容 1、人体表面和实验室环境微生物检查 （1）人体表面微生物检查 ①洗手前手指上微生物检查 ②洗手后手指上微生物检查 ③鼻孔中微生物检查 ④头发上微生物检查 （2）实验室环境微生物检查 ①试验台表面微生物检查 ②实验室门旋钮表面微生物检查 ③实验室灰尘微生物检查 ④实验室空气中微生物检查 2、实验台表面消毒 3、微生物分离、转管培养及无菌技术 （1）细菌划线转管培养 （2）细菌平板涂布接种培养 （3）放线菌插片培养 （4）真菌转管培养