可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定.doc

可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 实验原理、方法、步骤和现象： 知识点 可溶性还原糖 脂肪 蛋白质 实验原理 与斐林试剂反应生成砖红的沉淀 被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色） 与双缩脲试剂反应产生紫色物质 实验 步骤 样液 制备 选材 含糖较高、颜色白色或近于白色的植物组织，苹果、梨最好 富含脂肪的种子，以花生最好 浸泡1-2d的黄豆种子（或用豆浆）或用鸡蛋蛋白 方法 苹果切块→研磨→过滤→滤液 制作花生种子的切片 黄豆浸泡切片→研磨→过滤→滤液 鉴定 步骤 样液→加斐林试剂→振荡→水浴加热煮沸 切片→染色→漂洗→镜检 组织样液→加双缩脲试剂A→再加双缩脲试剂B→观察颜色变化 实验现象 蓝色→棕色→砖红色沉淀 脂肪被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色） 加双缩脲试剂A无明显变化，加双缩脲试剂B后溶液变成紫色 注意事项 1、选材要用含糖较高、颜色白色或近于白色的植物组织2、斐林试剂不稳定，一般配成甲液（NaOH：0.1g/ml）乙液（CuSO4：0.05g/ml）来保存，用时必须将甲、乙两液混和均匀后使用，切勿分别加入组织样液中进行检测 切片要尽可能的薄 染色后一定要用50% 的酒精溶液洗去浮色 3、观察时找最薄处最好只有1---2层细胞 1、用鸡蛋蛋白时，一定要加以稀释，如果稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管内壁上，使反应不彻底，且试管不易洗干净 2、双缩脲使用时，应先加A造成碱环境，再加B 巩固练习： 1、选择题 （1）下列关于操作步骤的叙述中，正确的是 （ ） 用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定 脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴 鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液 用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，必须现混现用 （2）斐林试剂鉴定可溶性糖时，溶液的颜色变化过程为 （ ） 浅蓝色→棕色→砖红色 无色→浅蓝色→棕色 砖红色→浅蓝色→棕色 综色→绿色→无色 （3）在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择叙述中，错误的是 （ ） 甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可用于进行可溶性还原糖的鉴定 花生种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料 大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料 鸡蛋清含蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料 （4）某学生在鉴定脂肪的实验中，在显微镜下观察花生子叶切片，当转动细调节器时，有一部分细胞看的清楚，另一部分较模糊，这是由于 （ ） A.反光镜未调节好 B.标本切的厚薄不均 C.细调节器未调节好 D.显微镜物镜损坏 （5）鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂的正确做法是 （ ） 先加A液，混合后再加B液摇匀观察 先加B液，混合后再加A液摇匀观察 C．A、B混合后加入，摇匀观察 D．A、B液同时加入样液，摇匀后观察 （6）将面团包在纱布中在清水中搓洗，鉴定留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆分别用的试剂 （ ） A．碘液、苏丹Ⅲ B.双缩脲、碘液 C.亚甲级蓝溶液、苏丹Ⅲ D.碘液、斐林试剂 2、简答题 （1）请说出斐林试剂与双缩脲试剂在组成上和用法上有什么不同？ （2）双缩脲的结构式为NH2CO–NH–CONH2，它可以和双缩脲试剂发生紫色反应。请问为什么蛋白质可以和双缩脲发生紫色反应而氨基酸却不能进行此反应？ （3）糖尿病病人的尿液中含有大量的葡萄糖请用你所学的知识设计实验证明葡萄糖的存在。 （4）据药理研究，一种茅草的根内含有降血糖的因子及多种益于健康的成分，某公司将它开发为一种保健饮料。该产品是否适用于糖尿病患者，生物兴趣小组的同学依次作为研究课题，请你完成下面的实验鉴定报告。 ①实验目的：鉴定一种茅草的根是否含有还原性糖和淀粉。 ②实验原理：还原性糖可用 试剂鉴定，淀粉可用 试剂来鉴定。 ③实验器材：一种茅草的根、所需试剂、刀片、载玻片、酒精灯、试管夹、火柴、滴管。 ④实验步骤：ⅰ）鉴定还原性糖： ⅱ）鉴定淀粉： ⑤实验现象： ⑥结果分析： 。 ⑦在鉴定还原性糖的实验操作中应注意： 。 答案：1、