中药材知母中皂苷类成分分析.pptx

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中药材知母中皂苷类成分分析

中药材知母中有效成分分析概述;药材概述;知母·概述;皂 苷;;;甾体皂苷: 1、苷元结晶性好,易溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙醚等有机溶剂 2、皂苷多为无定性粉末,易溶于热水,稀醇 3、均具有旋光性,多为左旋 4、具有溶血性 5、皂苷的乙醇溶液可与甾醇形成难溶的分子复合沉淀物 6、颜色反应:L-B,R-H反应可与三萜皂苷进行区分;2010版药典中中药知母TLC鉴别;香草醛(3-甲氧基-4-羟基苯甲醛)-浓硫酸显色剂 是薄层色谱广泛使用的一种通用显色剂 应用:在挥发油、萜类、甾类和皂苷等中药成分的薄层分离中,多能显示出颜色各异的斑点 未改进配制:含有1%香草醛的浓硫酸溶液 缺点:粘度高 喷显困难,往往使显色点呈“花斑状”,模糊不清 易将薄层表面喷散,对薄层扫描定量影响很大 改进方法:将浓硫酸中加入一定量的水以降低其粘度 结果:70%或60%的硫酸配置的显色剂,对样品显色的灵敏度、显色速度和呈色稳定性与浓硫酸配制基本相同。 现配制方法: 1g的香草醛加到60%的硫酸100ml中(1%) 15g香草醛+250ml乙醇+2.5ml浓硫酸(5%) 5g香草醛,用10%硫酸乙醇100ml(无水乙醇) (5%) ;知母总皂苷老鼠灌胃;样品前处理:30ul血浆样本,文献用量 提取:乙腈蛋白质沉淀法 流动相选择:乙腈 ∶ 1 mmol·L-1乙酸铵溶液( 30:70,V :V) 色谱柱: Agilent Zorbax SB-C18 柱( 4. 6 mm × 150 mm,5 μm) 峰型好,分离度佳 分析时间长 AlltimaHP C18 柱( 2. 1 mm × 50 mm,5 μm) 良好峰型 缩短分析时间:t(知母皂苷 B-Ⅱ)=1.78min t(重楼皂苷,内标)=1.96min 分析周期3min;含量测定;HPLC-ELSD;显色剂-UV;目的:通过制备菝葜皂苷元多克隆抗体,建立ELISA 分析方法,对知母药材中的总皂苷进行了含量分析;菝葜皂苷元 (SAR);参考文献: [1].中华人民共和国药典. 中华人民共和国药典委员会.北京.2010. [2].陈万生 ,乔传卓. 知母本草学研究[J].中药材.1997,20(1):53-54. [3].徐爱娟,韩丽萍 ,蒋琳兰.知母的研究进展[J].中药材.2008,31(4):624-628. [4].蔡飞,王维豁,高守红,等.知母皂苷及其苷元的药理作用???展[J].药学实践杂志.2011,29(5):331-335 [5].吉星,冯毅凡.知母中皂苷类成分研究进展[J].中草药.2010,41(4):附12-附15 [6].廖洪利,王伟新,赵福胜,等.知母化学成分研究进展[J].药学实践杂志.2005,23(1):12-14. [7].Hikino H,et al. 知母的化学成分与药理活性[J]. 国外医药·植物药分册. 1992,7(2): 59-61 [8].康利平,马百平,史天军,等. 知母中的两种新呋甾皂苷[J].药学学报.2006,41(6).527-532. [9].孟志云,徐绥绪,李文,等,知母中新的皂苷成分[J].中国药物化学杂志.1999,9(4):294-298. [10].匡海学.中药化学[M].北京:中国中医药出版社.2003. [11].周智.芒果苷药理实验研究新进展[J].内科.2011,6(5):426-464. [12].邓家刚,郑作义,曾春晖.芒果苷的药效学实验研究[J].中医药学.2000,20(6):802. [13].陈行愉,韩丽萍,梁均乐. 知母甾体总皂苷中知母皂苷 BⅡ的鉴别及含量测定[J].时珍国医国药.2012,23(2):401-402. [14].欧阳辉,黄小方,周茂福,等. 知母皂苷A-Ⅲ、知母皂苷C对照品的制备与鉴定[J].中国药房.2011,22(15):1391-1393. [15].姚乾元,贾元印.香草醛-浓硫酸薄层色谱显色剂的改良[J].中药通报.1986,11(7):47. [16].梁均乐,韩丽萍,蒋琳兰,等.大鼠口服知母皂苷后入血成分研究[J].广州医药.2010,41(3):69-72. [17].王莉,贾彦波,陈方,等.HPLC-MS-MS法测定大叔血浆中的知母皂苷B-Ⅱ[J].中国药理学通报.2010,26(8):1064-1068. [18].陈千良,孙小明,王文全,等.HPLC-ELSD法同时测

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