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生化科技學系 酵素純化與分析 2
2 色層分析法︰
2.1 色層分析原理︰
a. 系統組成：
每種層析系統均由兩個 「相phases 」組成，主要分成 固定相(stationary phase) 及流動相
(mobile phase) ，二者各有不同的極性或非極性強度。而樣本分子因自身極性的強弱，與
此二相之親和力不同：與固定相之親和力較大者，易留滯原地；與流動相之親和力大者，
則易隨流動相移動，因而達到分離的效果 。圖2.1 以圖解說明此一機制。
圖2.1 色層分析法原理Principle of chromatography
A B C
Two-phase
Sample Sample
Non-
Polar
polar 每次分離樣本
都要做一次選擇
Non- Polar One Plate of S
Polar Separation L L
Theoretical
plate L
number
Mobile Stationary
phase phase
流動相 固定相
ADSORPTION PARTITION
樣本分子依其分子極性
Liquid - Solid Liquid - Liquid
選擇親和兩相之一
Two-phase separation system
b. 極性大小：
這種親和力的產生，決定於樣本或兩相物質之化學本質，是屬極性或非極性，進而遵循
『Like dissolves like 』的原則；即極性分子較易溶入極性的固定相或流動相，非極性分
子則易溶入非極性者；因此一個樣本分子，就依其極性大小在此兩相間做選擇與分離 。
c. 方式很多：
因為固定相或流動相可能是 固(S) 、液(L) 或 氣 (G) 相之一，故可有多種組合方式：
Partition chromatography: 固定相(L) 流動相 (L) 例：PPC, TLC, 膠体過濾
Adsorption chromatography: 固定相(S) 流動相 (L) 例：TLC, 離子交換
Gas-liquid chromatography: 固定相(L) 流動相 (G) 例：GC
EPA 2018 29
酵素純化與分析 2 國立臺灣大學
d. 常用層析方法：
表2.1 常用層析法Common chro
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