以假病毒为基础的HIV-1中和抗体检测体系的建立以及初步应用.pdfVIP

.468. 中华徽生物牵挂和~应学杂志2008 年5 月第2s卷自5 期 chin J Microbiol lmm皿时. M.ay2008. VoI .2S. No.5 ·免疫检测· 以假病毒为基础的 HIV-l 中和抗体 检测体系的建立以及初步应用 4中辉草古典坤学张春涛聂建辉孔维王佑春 l 拥要 1 目的 建立以ft病毒为基础的 HJV.J 中和抗体位测方法，并对其进行初步应用。方 法从重组质位中扩增出gptω 基因片段，并克隆到pcDNA3.1 质魅上，面切鉴定得到阳性克隆。 将 阳佐克隆分别和萨G3.ð.env 质桩共转娘获得假病毒。用假病毒分别险测t拉克隐抗体和 HJY.l 抗体阳 性血清的中和活性。 结果成功地获得了 4 株假病毒CHBOI 、 CHB02 、CHB(础和CHA日问。 1拉克隆 抗体4EI0 可以中和4 株假病毒;单克隆抗体2F5 不能中和 CHBω3 假病毒株，但可以中和 CHBOl 、 CHB02和 CHAE剧假病毒i1:õ 单克隆抗体 IgClbl2 可以中和CHBω3、 CH阳和CHB02 假病毒株，则 不能中和CHAE04假病毒株。 43 份 HIY.I 抗体阳性血清中针对不同假病毒的中和抗体明显不同。 结论 所获得的假病毒可以用于中和抗体的检测，但不同假病毒栋的中和符姓不同。 {关键词) HJV.lõ 中和抗体;假病毒 b钮bω恤田田en削t and prl皿arya叩.pplica峭佣。olpe剧dω。叫vin瞌.b凶ed DeU衍刽iza耐。俯画筒s跑8y fol阳V-l CHONG H刷ω.huiω 仰H，ON附G Kui üj拚ë S衍tωu时e， Ji加U阳versi1r， CIw.r啄chun 13ω12 ， ChiM COesporuli问ØUÚlor: WANG Yo叫山， M时ioruù InstilJJtφr lhe co叫01Plaarrnauutical arul B，归1ogic4l Prrxb.皿虹， 8eijing IαXJ50， Chi.ruJ. E,iJ: wychun3@raJwo. 四m [ Ab8tract ) 0均创刊 To 幅幅bl ish a p叫阴阳.baaed neutrali翩翩翩ay. M幽幽~ functional gpl60 gen回 were amplified from plasmids ωntaining HJY.t gene. The products were 1igl酬d into pcDNA3 . 1 plasmid and p帽itíve clones were 盹r臼ned by dig.臼tion wilh reslriction enzym曲.ηe pseudovir. U酬were harvested by cOlransfection of 阳阳itive done and 阱G3 .ð.env plasmid. The neu时izing activi. ti回 σf monoclonal antibodies and HIV-1 antib均严眉itive pl幽阳 were measured by these p6eudoviruses. Results The four strains of ps创OVlru附(CH盼1 ， CH盼2 ， CHBω3 and CHA日间) had been successfully obtained. Mon创lonal anli协dy 4F: 10 could neutralize all of 4 pseudoviru时s while 2GJ2 cou1d not neu廿alize anyp唱udovirus盹 Monodonal anti协dy 2陀 could neutralize 阳udovÎIUs CHB0 1• CHB02 and CHAE04 but nol CHßω3， while IgG 1b12 could neutralize 阳udovirus CH B0 1, CHß02 and CHBω3 bul not CHAE04 The neutr观lizing activities of 43 of HJV-1 制tibody 阳)Sitive pl幽1n8 a兽inst differ