差示紫外分光光度法测定酱油中苯甲酸钠的含量.doc

[收稿日期] 2006-05-11[作者简介] 王仲伟（1964-）男，高级讲师，主要从事食品分析检验工作。差示紫外分光光度法测定酱油中苯甲酸钠的含量王仲伟(上海农林职业技术学院食品科学技术系，上海金山：201500 )摘 要：用无苯甲酸钠酱油为本底，绘制标准曲线。将酱油制品经乙醚提取分离后，采用差示紫外分光光度法测定酱油中苯甲酸钠的含量，简化样品处理步骤，方法简便可靠，经对实样分析，得到了与国家标准检验方法（紫外分光光度法）基本一致的结果。可以作为酿造厂测定酱油中苯甲酸钠含量的有效方法之一。关键词：差示紫外分光光度法；苯甲酸钠；酱油；含量测定苯甲酸钠对各种微生物有抑菌作用，可以作为酸性食品的防腐剂。常用于酱油、果汁等食品的防腐。但苯甲酸钠有毒，在食品中用量必须限量，规定每千克食品最多允许加1克，ADI值为0~5mg/kg。苯甲酸钠含量的测定已报道的方法有滴定法、紫外分光光度法、薄层层析法、气相色谱法[1]、高效液相色谱法[2]，尚未见有差示紫外分光光度法测定酱油中苯甲酸钠含量的报道。本文以加样的0.01mol/L氢氧化钠溶液作参比，测定加样的0.1mol/L盐酸溶液吸光度，其测定波长为235.5nm，浓度在6~18mg/L范围内符合比尔定律。方法简便易行，不受辅料的干扰，回收率为99.7%~104.1%，RSD为1.32%；并与紫外分光光度法比较，结果满意，有较强的实用价值。1仪器及试剂1.1仪器UV-2401岛津分光光度计1.2试剂无水乙醚、氢氧化钠、盐酸、苯甲酸钠均为分析纯，无苯甲酸钠酱油为金山酿造厂提供。标准溶液使用液制备：精密称取苯甲酸钠100mg，用无苯甲酸钠酱油溶解定容至100ml。精确移取10ml放入50ml具塞比色管，加入2ml 1:1HCl摇匀，依次用30ml、20ml、15ml无水乙醚振摇提取三次，每次2min，用滴管吸取上层醚层，合并三次乙醚提取液，将提取液置通风橱中挥发（或回收）。去醚后剩余约0.5~1ml溶液，用1mol/LNaOH溶液溶解，用0.01mol/LNaOH定容至100ml，即为标准溶液使用液。2实验方法2.1测定波长精密吸取5ml标准使用液两份,各置于50ml具塞比色管中,分别用0.01mol/LNaOH溶液和0.1mol/LHCl溶液稀释至50ml刻度，摇匀，以0.01mol/LNaOH溶液作参比，在波长200~260nm范围内对0.1mol/LHCl溶液进行扫描，苯甲酸钠在235.5nm处有强烈吸收，见图1。图1：吸收光谱2.2标准曲线的绘制精称105℃干燥至恒重的苯甲酸钠标准品200mg，用无苯甲酸钠酱油溶解定容至200ml，按上述方法处理成标准溶液使用液。用碱式滴定管正确加入3ml、4ml、5ml、6ml、7ml、8ml、9ml各两份，分别置于50ml具塞比色管中,一组用0.01mol/LNaOH溶液稀释至50ml刻度，另一组用0.1mol/LHCl溶液稀释至50ml刻度，摇匀。以0.01mol/LNaOH溶液作参比，在波长235.5nm处测定0.1mol/LHCl溶液的吸收度，工作曲线如图2，求得回归方程：Conc=31.89A+1.069，r= 0.9999，由回归方程可知，苯甲酸钠在6~18mg／L范围内吸收度与浓度的线性关系良好。图2：苯甲酸钠标准曲线3准确度和精密度用不含苯甲酸钠的酱油为本底，进行10次加标回收实验，测得的吸光度代入回归方程,实验结果回收率为99.7%~104.1%,平均回收率102.2%，十次测定的RSD为1.32%，见表1。表1 准确度和精密度序号加入量mg测出值mg回收率％1100101.6101810251036101210391009101.9810099.7991104.110100103.2103.24样品分析取酿造厂酱油7瓶，按实验方法测定，同时与紫外分光光度法比较，结果（见表2）基本一致。 表2批号本法g/L紫外分光光度法g/L200005100.930.89200005100.930.88200005100.910.85200005100.900.85200005100.920.90200005100.900.86200005100.920.87x0.910.87RSD1.64%2.24%5结果与讨论5.1苯甲酸钠在1mol/LHCl、0.1mol/LHCl、0.01mol/LHCl溶液中，吸收图谱相似，但0.01mol/LHCl溶液吸收值较小，0.1mol/LHCl、1mol/LHCl溶液较理想，所以选用0.1mol/LHCl溶液为测定介质。5.2在选择实验条件时