分子生物学（张海红）生物化学--第十二章-核酸的生物合成.pptVIP

-35序列 -10序列 (Pribnow box) 1. σ亚基使RNA聚合酶识别启动子 -35序列提供RNA聚合酶识别信号 -10序列有助于DNA局部双链解开 ? 起始过程中，σ因子起关键作用，它能使聚合酶迅速地与DNA的启动子结合。 开放复合物 2. 转录的起始 ? 转录起始后，σ亚基释放，离开核心酶，使核心酶的β’亚基构象变化，与DNA模板亲和力下降，在DNA上移动速度加快，使RNA链不断延长。 3. 转录链的延长 转录泡 模板链 编码链 正超螺旋 负超螺旋 4. 转录链的终止 ? 许多转录过程可被基因末端的一段特异的碱基序列所终止。提供转录停止信号的DNA序列称为终止子（terminator）。 所有原核生物的终止子在终止点之前都有一个回文结构，它转录出来的RNA可以形成一个颈环式的发夹结构。 发夹结构 十字形结构 ⑴ 不依赖于ρ的终止子（简单终止子） 简单终止子除具有发夹结构外，在终止点前有一寡聚U序列；回文对称区通常有一段富含GC的序列。 RNA的终止有两种方式： ⑵ 依赖ρ的终止子 依赖ρ的终止子，必需在ρ因子存在时，才发生终止作用。ρ因子又称终止因子，可水解三磷酸核苷。 回文序列 茎环结构 寡聚U序列 不依赖于ρ的终止子 依赖ρ的终止子 转录终止后，RNA聚合酶从DNA链上脱离下来。 ㈢、真核生物RNA合成的特点 1. 真核生物的RNA聚合酶 2. 真核细胞新生RNA的加工 ? RNA聚合酶合成的原初转录产物（primary transcript），要经过剪切、修饰、拼接等过程，才能转变成成熟的RNA分子，此过程称RNA转录后的加工。 二、RNA的复制 有些RNA病毒，进入寄主细胞后，借助复制酶而进行RNA病毒的复制。 RNA病毒的RNA复制酶具有很强的模板特异性，只识别病毒自身的RNA，它以病毒RNA为模板，合成与模板性质相同的RNA。 1、正链RNA病毒（mRNA）：噬菌体Qβ、灰质炎病毒等 进入寄主细胞后，利用寄主的翻译系统，首先合成复制酶及有关的蛋白质，然后进行病毒RNA的复制，最后由病毒RNA和蛋白质装配成病毒颗粒。 2、负链RNA病毒（带有复制酶）：狂犬病毒等 此类病毒带有复制酶，侵入后，复制酶首先合成出正链RNA（mRNA），再以正链RNA为模板，合成负链RNA及蛋白质，然后装配。 RNA病毒的复制方式： 3、双链RNA病毒（带有复制酶）：呼肠孤病毒等 以双链RNA为模板，在复制酶作用下先转录正链RNA（mRNA），从而翻译出蛋白质，然后合成负链RNA，形成双链RNA，再包装。 4、 反转录病毒（含反转录酶）：白血病病毒、肉瘤病毒等致癌RNA病毒 正链RNA病毒，它们的复制需要经过DNA前病毒阶段。 ? 1.名词解释 半保留复制 、 半不连续复制、 复制子、 冈崎片段、 前导链、 随后链、 逆转录 、转录、启动子、终止子、hnRNA 3. 简述原核生物RNA转录的过程？ 4、比较DNA复制与RNA转录的异同？ 2. 试述参与原核生物DNA复制的酶及蛋白因子，并说明功能。 ⑵ DNA复制的延长 ? 滞后链合成的模板形成环，复制叉上的二聚体DNA聚合酶Ⅲ全酶同时合成两条子链。 前导链 (leading strand): 以亲代3’→ 5’ 链为模板，子代能 连续合成。 滞后链 (lagging strand): 以5’→ 3’为模板，不能连续合成。 冈崎片段 (Okazaki fragment): 滞后链上的小片段。 ? 半不连续复制（semidiscontinuous replication）：DNA复制过程中，新生的DNA链一条按5’→ 3’ 方向（与复制叉移动方向一致）连续合成，另一条按5’ → 3’ 方向（与复制叉移动方向相反）不连续合成。 4. DNA聚合酶Ⅲ 1. 解链酶 2. 单链结合蛋白 前导链 冈崎片段 3. 引物酶 5. 聚合酶Ⅰ 6. 连接酶 复制叉 引物 ⑶ DNA复制的终止 大肠杆菌环状DNA复制叉相遇即终止 ⑴ DNA旋转酶引入负超螺旋，消除复制叉前进时带来的扭曲张力。 ⑵ DNA解链酶解开双链DNA。 ⑶ SSB结合于DNA单链。 ⑷ DNA引物酶(在引发体中)合成RNA引物。 ⑸ DNA 聚合酶Ⅲ在两条新生链上合成DNA。 ⑹ DNA 聚合酶Ⅰ切除RNA引物，并补上DNA。 ⑺ DNA ligase连接一个冈崎片段。 小 结 ? 逆转录（reverse transcription）：以RNA为模板合成DNA的过程，与通常转录过程中遗传信息流从DNA到RNA的方向相反。 二、逆转