第五章－法医人类学－一人及多人骨的检验.pptVIP

法医人类学 余　舰　副教授 第五章　一人骨或多人骨检验 教学目的要求 1、掌握和熟悉：骨骼的形态学检查、人类学指标检查、血清学检查。 2、了解：分子生物学检查。 教学内容 骨骼的形态学检查、人类学指标检查、X线检查、血清学检查、骨骼型物质的检验步骤、解离-试管法、解离-抽提法、凝集-抑制试验；分子生物学检查。 形态学方法 人类学指标 影像学方法 免疫学方法 生物学方法 检验方法 第一节 骨骼的形态学检查 　　　首先检查骨骼数量是否齐全，观察有无重复，左右是否对称，成人骨骼总数206块，婴幼儿因软骨未骨化及骨性连接尚未形成故可有270块之多。在总数上确定后，再观察骨骼的大小、形态、颜色以及骨骼之间相互连接的吻合状况。 　　　一般而言，数量完整的人体骨骼通过形态学复原及检验不难识别，但须注意检查并考虑到多趾(指)、重手等畸形的情况。 案例：某菜地挖出492块尸骨碎片。经形态学观察和比对，其中人骨骼为433块。计有颞骨8，额骨7，顶骨和下颌骨各4，上颌骨5，枕骨3，锁骨8，肩胛骨9，肱骨6，尺骨7，桡骨5，椎体27，肋骨50，骶骨1，髋骨5，髂骨3，坐骨3，耻骨1，股骨8，胫骨6，腓骨6，尸骨碎片256。 右侧颞骨5、髋骨2对半、髂骨1对半等确定为5具尸体的骨骼。 其中有1对半儿童髂骨、2个混合牙列的下颌骨，判定有2名儿童。 返回 第二节 人类学指标检查 　　 如果大体形态学检查尚难以将多人骨区分开时，可借用人类学指标的检查进行识别，如首先对重要的有价值的骨骼如骨盆、颅骨、四肢长骨等进行性别、年龄、身高的检验鉴定，再将相应的骨骼归类排列。 返回 第三节 X线检查 人类学上，X线检查骨骼干骺端钙化愈合的状况推断年龄(具体方法将在有关章节中介绍)，依据这一原理，同样可用于多人骨的区别，特别是当只有极少量骨骼，并且大体形态学特征不明显或仅凭肉眼无法鉴别时，使用x线检查，在许多情况下，比如骨骼的年龄差异，骨骼发育的差异等，可能会达到满意的区别效果。 　　如果死者生前有较完整的骨骼X线摄片档案，常常可以作出同一认定的推断。 返回 第四节 血清学检查 当遗留骨骼量少，尤其是受各种因素影响使骨骼遭到破坏，无法从形态学、人类学和X线检查来区别是一人骨还是多人骨时，血清学血型的检查是一较经典的区别方法。骨骼和毛发是人体组织中保存型物质最稳定且时间最长的组织。据报道，保存2000余年的长沙马王堆汉墓女尸的毛发和骨骼中均检出了型物质。 骨骼型物质的检验步骤如下： 1．将遗骨水煮(小于30min)，去除杂质，晾干。 2．锯取骨骼10g左右，磨成粉末状备检。 3．骨粉须乙醚脱脂，蒸发干燥。 4．型物质(A，B，H)的检验方法有以下四种。 　　解离-骨粉粘贴法、解离-试管法、解离-抽提法及凝集-抑制试验。 凝集-抑制试验用得较多。具体方法如下： 1)用上述方法提取骨骼中型物质； 2)25ul抽取液，在瓷板上用生理盐水作倍量稀释(三列，每列6凹)； 3)每列分别加抗A、抗B和抗H血清25ul(效价1:4或1:8)； 4)室温下4小时后加入相应A、B、H 0.2％红细胞悬液1滴； 5)镜下检验。 返回 第五节 分子生物学检查 自1985年Jeffreys报道在法医学实践中成功地运用人类遗传基因脱氧核糖核酸(DNA)的分子生物学检测技术进行个体识别以来，DNA分析技术已被广泛地应用于亲子鉴定、性别鉴定、个体同一认定等实际案例中。 随着科技的发展和研究的不断深化， DNA分析技术不仅在方法学上有所进展，如多位点和单位点的DNA指纹技术、DNA体外扩增技术、线粒体DNA(mtDNA)直接测序技术等，而且DNA分析技术的检样也从开始的血液发展到包括陈旧性骨骼在内的几乎所有人体组织，且不论其新鲜与否。 DNA分析技术有几大优势：其一，目前应用mtDNA直接测序的方法已有成功地从7000年前的人体骨骼和牙齿中提取了DNA片段并进行个体识别的报道。其二，DNA分析技术不仅能轻易地区别人骨，只要条件合适，可进行多种其它的鉴别，如性别、个体认定等。其三，DNA分析技术所用的检材量较少，一般作陈旧性骨骼的血清学检查须骨粉1g甚至更多，但DNA分析仅需10～20mg即可。