植物组织培养课程论文.docx

天津师范大学生命科学学院《植物组织培养》课程论文——百合的组织培养研究摘要：百合是百合科百合属，多年生草本球根植物。是著名的观赏花卉，可食用，有很高的利用价值。利用组织培养进行繁育是百合无毒化和商品化的必要途径。由于百合的常规繁殖率低，易感染病毒，所以对繁殖技术提出了更高的要求，人工繁殖技术对百合具有重要的意义。本实验主要通过植物组织培养手段，以MS为基本培养基，以百合鳞茎为外植体，对其进行灭菌消毒，并置于温度为25摄氏度，湿度为80%的温箱中，8小时睡眠16小时光照的情况下进行培养。随后观察其生长情况，并拍照记录。本次实验外植体成功发育成愈伤组织，并长出芽。此实验主要在于掌握植物组织培养技术，了解其方法过程。关键词：组织培养；百合；无菌操作一、文献综述1.1百合组织培养技术进展百合植物资源丰富，栽培历史悠久，花色多样，它不仅适用于庭院栽培，布置花境，也可盆栽观赏，并早已成为花卉研究领域的佼佼者。百合虽然观赏性很高，但大多抗性很弱，尤其抗寒性。一般在东北地区种植商品百合时，每年秋季必须起球，窖藏或者冷库存放，这大大增加了百合的生产成本，限制了东北地区花卉业的发展。随着百合在国内外鲜切花市场的走俏，百合花生产和消费逐年增加，但由于百合种球繁殖率低，病毒侵染造成退化，难于满足切花生产需要。目前主要采用组织培养进行百合脱毒和快速繁殖，以促进百合商品种球的生产。但是百合试管苗小鳞茎较小，结鳞茎时间较长，移植成活率低，制约了工厂化商品生产。目前国内繁殖百合主要通过进口鳞茎进行繁殖。但是市场售价较高，而且有时鳞茎质量难以保证、繁殖率低、易造成鳞茎退化。采用组织培养的方法在很短时间内可以得到大量的组培苗，而且一般在第二年即可开花。[1]1.2植物组织培养概述植物组织培养是一种将植物体的部分细胞或组织与母体分离，在适当的条件下加以培养，使它们能够生长、发育、分化与增殖的技术。原理是来自植物细胞的全能性分化能力，也就是植物体内的某一类细胞，能够独立发育并且分化成为完整的植物成体。植物组织培养能够以少量的母体培养出大量的植物，这使植物组织培养有许多的用途，例如基础植物学与遗传学研究，以及农业上的育种与品种保留。[2]植物组织培养是根据植物细胞具有全能性的理论，利用植物体离体的器官、组织或细胞以及原生质体,在无菌和适宜的人工培养基及温度等人工条件下，能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根，最后形成完整的植株。1902年，德国著名植物学家G.Haberlanclt根据细胞学理论，大胆地提出了高等植物的器官和组织可以不断分割，直到单个细胞，即植物体细胞，在适当的条件下，具有不断分裂和繁殖，发育成完整植株的潜力的观点。1943年，美国人White在烟草愈伤组织培养中，偶然发现形成一个芽，证实了G.Haberlanclt的论点。组织培养选用的基础培养基一般较多采用的是MS。采用固体培养基较多，因为相比液体培养基，固体培养基在操作上更方便，被广泛使用。在基础培养基里添加一定的外源激素，可以诱导出愈伤组织、胚状体、不定芽、根等器官，最终可获得再生植株或者次生产物。常用的激素类型有生长素类、细胞分裂素类、赤霉素等。[3]参考文献：[1]:周威，《百合的组织培养》，科技向导，2011年第09期[2]:/wiki/%E6%A4%8D%E7%89%A9%E7%B5%84%E7%B9%94%E5%9F%B9%E9%A4%8A[3]:梁一池，杨华，《植物组织培养技术的研究进展》，福建林学院学报，2002, 22(1):93-96二、百合植物组织培养2.1实验试剂　　NH4NO3, KNO3, CaCl2?2H2O, MgSO4?7H2O, KH2PO4, KI, H2BO3，MnSO4?4H2O, ZnSO4?7H2O, Na2?MoO4?2H2O, CuSO4?5H2O, CoCl2?6H2O, Na2?EDTA?2H2O，FeSO4?7H2O，烟酸，甘氨酸, 盐酸硫胺素, 肌醇, 盐酸吡哆醇；琼脂，蔗糖，蒸馏水，NAA，6-BA，1mol/L HCl，1mol/L NaOH；75%酒精。2.2仪器　　冰箱、天平、酸度计或pH试纸、电炉、高压灭菌锅、超净工作台、光照培养箱、三角瓶、容量瓶、量筒、移液管、烧杯、培养皿、滤纸、牛皮纸、绳、玻璃棒、镊子、刀等。2.3生物材料　　百合三、实验步骤3.1培养基的配制　3.1.1配制培养基母液的配制方法大量元素的配制：依次称取KNO3 19g、NH4NO3 16.5g、MgSO4?7H2O 3.7g、KH2PO4 0.17g、CaCl2?2H2O 4.4g ,分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，以防互相发生反应，最后用容量瓶定容至1L,转入试剂瓶中，贴上标签，置冰箱冷藏保存。微量元素的配制：依次称取MnSO