张艳霞论文.doc

 摘 要 在PH=7.4 Tris-HCl缓冲溶液中，运用荧光光谱技术分别在295 K、303K、310K、317K (H(0，(S(0(G=(H-T(S(0，2.0×1010,他们之间的猝灭为静态猝灭。 关键词：木犀草素；Mn2+和Ni2+；牛血清蛋白（BSA）；相互作用 Abstract In the PH = 7.4 Tris-of-HCl buffer solution, at the temperature of 295 K, 303K, 310K, 317K using fluorescence spectroscopy, the influence of Mn2 + and Ni2 + having on the interaction system of luteolin and BSA was studied. The experimental results show that in the existence of Mn2+ and Ni2+,the quenching of BSA and luteolin significantly strengthened. According to (H(0,(S(0can obtain (G=(H-T(S(0,it can be seen that there are electrostatic interactions between luteolin and bovine serum albumin. According to the double reciprocal equation, we can calculate the BSA and luteolin maximum diffusion collision quenching rate Kp2.0×1010 , Between them the quenching is static quenching. Key words:Luteolin;Mn2 + and Ni2 +;fluorescence quenching; bovine serum albumin ( BSA ); fluorescence quenching 目 录 摘 要 I 前 言 1 1 文献综述 2 1.1 2 1.2 金属离子对人体的影响 2 1.3 木犀草素 3 1.4 药物与蛋白质相互作用的研究现状 4 1.4.1 研究方法 4 1.4.2 研究进展 5 2 实验部分 7 7 2.1.1 药品试剂 7 2.1.2 仪器设备 7 2.2 实验步骤 7 3 结果与讨论 8 8 3.1.1 猝灭光谱 8 3.1.2 测定结合常数以及猝灭机理 8 3.1.3求取结合常数Kb及结合位点n 9 3.1.4 研究作用力类型及热力学性质 10 3.1.5同步荧光光谱 10 3.2 Mn2+对木犀草素与BSA相互作用的影响 11 3.2.1 荧光猝灭光谱图 11 3.2.2 同步荧光光谱 12 结 论 13 致 谢 14 参考文献 15 前 言 血清蛋白是血浆中含量最丰富的蛋白质，与各种小分子都有一定程度的相互作用，当药物进入人体或动物体后首先会与血清蛋白结合，通过血浆的存储与运输到达受体部位，从而长生药理作用。研究蛋白质的变化可为诊断疾病提供有价值的信息，同时对保持人体的健康有重要意义，所以研究药物与血清蛋白的相互作用[1]机制已成为药学领域研究的热点。药物小分子与血清白蛋白之间的相互作用研究目前使用的一些方法主要有：荧光光谱法[2]、紫外可见吸收光谱法、电化学法、极谱分析法等。荧光光谱法是最普遍最有效的一种研究方法，因为荧光法能提供荧光强度、激发光谱、发射光谱等物理参数，更好更准确的研究蛋白质的性质、结构及功能。 Mn2+和Ni2+都是生物体必需的重要金属元素，生物体缺少或摄入量过多锰和镍都会引起病变，影响机体的正常运行。 目前，采用荧光光谱法对金属离子与血清蛋白的相互作用及药物分子与血清蛋白相互作用的研究比较多，文献已经报道了Cu2+、Zn2+等与血清蛋白及各种药物与血清蛋白的相互作用。 木犀草素( Luteolin) 是黄酮类化合物的一种，具有抗菌、抗炎、祛痰、抗癌、利尿等多种功效。实验中在pH =7. 40的Tris-HCl 缓冲溶液中。采用荧光光谱技术研究了Mn2+和Ni+与牛血清蛋白以及木犀草素与牛血清白蛋白( BSA ) 的相互作用,并探讨了作用机理及各个参数。实验结果表明木犀草素与BSA的相互作用与别的黄酮类化合物情况相似, 都能对BSA的产生明显的荧光猝灭,。猝灭方式为静态猝灭，当加入Mn2+或者Ni2+时会明