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生物膜研究方法 * Poo, M. M. and Cone, R. A., Nature, 247:438, 1974 浦慕明 视紫红质蛋白在视杆细胞膜上的侧向扩散 Chao, N. M., Young, S. H., Poo, M. M., Biophys. J., 36:139, 1981 赵南明 细胞表面局部区域的“陷阱”模型 模型膜体系 I. 脂单层技术 Langmuir 方法 在液面上铺展脂单分子层，模拟细胞膜的一个层面 I. 脂单层技术 膜压测量技术 实质上就是表面张力的测量 通过这个参数反映蛋白质插入膜中的程度、多少 利用此法发现蛋白的前导肽段可以自发插入磷脂膜中，可能与蛋白的跨膜转运有关 I. 脂单层技术 应用：天花粉蛋白的pH依赖性插膜 天花粉蛋白从植物栝楼根中提取，栝楼为引产用中药，天花粉蛋白是其活性物质 能够进入哺乳动物细胞质中与核糖体结合并使之失活 实验证明它插入磷脂膜中的程度依赖于pH值 pH依赖性插膜的可能生理意义 结合其它实验结果，我们提出了pH下降导致天花粉蛋白从内吞泡内部逃逸的假设 模型膜体系 II. 脂质体技术 最接近细胞膜形状的模型膜体系 可分单层或多层 拒大小可分： 小：几十nm 中:100-300nm 大:可至?m量级 II. 脂质体技术－制备 利用超声可以获得小单层的脂质体 小单层脂质体经冻融等方法可以获得更大的脂质体 II. 脂质体技术－应用 细胞膜的融合是十分重要的生理过程 利用荧光共振能量转移技术（FRET）可以检测脂质体膜上的磷脂是否混合到一起 Donor Acceptor II. 脂质体技术－脂质体融合一 II. 脂质体技术－脂质体融合二 检查脂质体包裹物是否混合的方法 II. 脂质体技术－脂质体融合二 II. 脂质体技术－脂质体泄漏 预先共同包埋荧光剂及其淬灭剂，当脂质体破裂时将导致荧光剂摆脱淬灭剂，发出荧光 很多毒素可通过破坏细胞膜的封闭性杀死细胞 *