叶绿素与初级生产力的测定方法实验步骤.ppt

　　 3、水样叶绿素a的测定 水样B平行样 20～30mL 过滤 按实验步骤1 分别用GFY-160荧光法和960MC荧光计测Rb 按⑥式计算Chl-a 根据表2的数据和实验步骤3的结果，按⑨式计算该样水域的初级生产力水平PP。 4.初级生产力估算 五、数据处理和问题讨论 求Fd值和Q值。 计算水样Chl-a和初级生产力PP （两种仪器） 测溶解氧时要注意哪些事项？ 本实验有哪些主要误差来源？ 计算水样A、B平行样Chl-a含量的相对偏差 计算实验B用两种不同荧光计测定Rb求出的Chl-a的相对偏差 注意：实验报告要把计算过程写出来。 六、注意事项 采样地点：芙蓉湖，A样和Ｂ样在芙蓉湖内的不同站位采集。 水样A和B均应做平行样。 实验三 叶绿素a和 同化系数Q的测定 ●测定水体中叶绿素a含量和同化系数Q ●掌握初级生产力测定方法和估算 一、目的要求? 二、方法原理 地球上一切生命都需要能量，这种能量主要来自太阳。海洋生物所需要的能量，主要依赖于海洋中浮游植物体内的叶绿素，通过光合作用将太阳能转换为化学能。 海洋浮游植物是能量的原始转换者，在海洋食物链中是初始生产者，所生产的有机物和贮存的能量是海洋食物链的基础。 海洋初级生产力测定对海洋有机生产能力及渔业资源开发利用潜力的估算有着十分重要的意义。 海洋初级生产力测定方法有 叶绿素法 14C示踪法 叶绿素法 分光法 荧光法 1. 分光法测定叶绿素的原理 用丙酮萃取浮游植物中的叶绿素，然后用分光光度计测萃取液在不同波长下的吸光值，根据①～④式计算： 叶绿素a = 11.85E664－1.54 E647－0.08 E630 ① 叶绿素b = 21.03 E647－5.43 E664－2.66 E630② 叶绿素c = 24.52 E630－1.67 E664－7.60 E647 ③ 式中E为经750nm波长校正后的吸光值，即E值应扣除E750的数值，光程用1cm比色皿。 由于叶绿素a是浮游植物任一种群都具有的特征，而b或c不是任一种群都有，因此，通常用叶绿素a (Chl-a)表示初级生产力水平，其计算式为④式。 Ca（mg/m3）= ④ C－①式的结果； V丙酮－丙酮体积； V海水－海水体积。 叶绿素a丙酮萃取液受蓝光（340nm）激发产生红色荧光，用荧光计在波长670nm处测定提取液酸化前后荧光值，按⑤式计算： ⑤ 　　　 2. 荧光法测定叶绿素a的原理 因 故⑤式成为⑥式： ⑥ Rb—酸化前荧光值 Ra—酸化后荧光值 R —叶绿素a酸化因子(随仪器而异） V丙酮—丙酮提取液体积（mL） V海水—过滤海水体积（L） Fd —荧光计所用量程换算因子(mg/m3) Fd值确定的方法： ⑴标准叶绿素a校正 ⑵分光光度计校正 ⑴标准叶绿素a校正： 用纯叶绿素a配成母液，把母液稀释成一系列不同浓度的溶液并分别测定荧光读数，用直线回归法求出标定线的斜率Fd。 ⑵分光光度计校正(本实验采用此法)： 取一定体积处于指数生长期的单细胞藻，丙酮萃取其叶绿素a，测其吸光值E，按①式计算提取液叶绿素a浓度Cchl-a，然后在荧光计测其荧光值Rb，依⑦式计算Fd。 　 ⑦ Cadée和hegeman（1974）提出计算初级生产力简化公式： （8） 式中，P－每日现场初级生产力；Pa－表层水中浮游植物潜在生产力；E－真光层深度；D－每日光照时间。 3、初级生产力pp的计算 因为表层水E＝1m水深内浮游植物潜在的生产力： （8） 故可写成：