大理市第二人民医院检验科新项目开展申请表.doc

大理市第二人民医院检验科新项目开展申请表 项目名称 抗核抗体谱（ANA） 开展室组 生化室 主要负责人 杨玉奇 拟开展日期 2013年5月 目的、意义 及应用前景 1. nRNP/Sm: 混合性结缔组织病（高滴度RNP是MCTD的标志）、抗体滴度于疾病活动性相关,也见于(30-40%),的系统性红斑狼疮（SLE）,几乎伴有Sm抗体。 2. Sm : SLE（系统性红斑狼疮）特异性抗体,阳性率5-10%。 3. SS-A: 干燥综合征、SLE、新生儿LE,可经胎盘传给胎儿引起炎症反映和新生儿先天性心脏传导阻滞。 4. RO-52 : SS-A 52KD单位蛋白,可出现在多种自身免疫性疾病中,无疾病特异性,但有相关的临床预告价值。 5. SS-B : 干燥综合征、SLE(10-20%)的女性患者,在干燥综合征中抗SS-A抗体和抗SS-B抗体同时出现。 6. Scl-70: 进行性系统硬化症（弥散型）标志性抗体,发病快,预后差,多器官累及。 7. PM-Scl: 多肌炎与硬化症的重叠综合征,多肌炎,弥散型硬化症。 8. Jo-1: 多肌炎/皮肌炎,常与合并肺间质纤维化相关。 9. 着丝点蛋白B（CENP B） :局限型进行性硬化症、CREST综合征,雷诺氏综合征,原发性胆汁性肝硬化（PBC）。 10. 增殖性核抗原（PCNA）: SLE特异性抗体(2-10%),与SLE弥散型肾小球肾炎相关,对激素治疗敏感。 11. 双链DNA（dsDNA）: SLE特异性抗体,作为SLE的血清学标志,抗体滴度和疾病活动性正相关,可用于疗效监测。 12. 核小体: SLE标志性抗体(85%),可用于SLE早期诊断,与SLE肾炎相关。 13. 组蛋白: 仅有此抗体阳性,而不伴有其他ANA(抗ssDNA抗体除外),则强烈支持药物诱导性红斑狼疮的诊断。 14. 核糖体P蛋白: SLE标志性抗体(10-40%),提示SLE活动期,常见于伴精神异常或肝脏以及肾脏受累的SLE。 15. 线粒体2型(AMA M2): PBC特异性抗体(96%),其他慢性肝病(30%),进行性系统硬化症(7-25%)。 国内、国外 省内、市内 应用状况 省内每家医院都有开展，大理州医院也开展此项目。 开展新项目 具备的人员 技术、设备和 设施条件等 我科开展抗核抗体谱的工作人员已经过工程师培训过，已具备良好的技术，设备和设施条件都可以满足开展此项目。 关键技术和 实施方案 检测步骤 1.1预处理： 取出所需的膜条，将其放入温育槽内。膜条上有编号的一面朝上。在温育槽中分别加入1.5ML样本缓冲液，于室温在摇床上温育5分钟后，吸去温育槽中的液体。 1.2 血清温育第一次：在温育槽中分别加入1.5ML已稀释的血清样本，在摇摆摇床上室温（18°C-25°C温育）30分钟。 1.3清洗：吸去槽内液体，在摇摆床上用1.5ML清洗缓冲液清洗膜条3次，每次5分钟。 1.4 酶结合物温育第二次：在温育槽中加入1.5ML已稀释的酶结合物（碱性磷酸酶标记的抗人IgG），于摇摆摇床上室温温育30分钟。5.1.5清洗: 吸去槽内液体,在摇摆床上用1.5ML清洗缓冲液清洗膜条3次，每次5分钟。 6底物温育第三次：在温育槽中加入1.5ML底物液，在摇摆摇床上室温（18°C-25°C温育）10分钟。 1.7终止：吸去槽内液体，用蒸馏水清洗膜条3次，每次1分钟。 1.8结果判断：将检测膜条放置在结果判定模板中，风干后判定结果。 1.8.1根据抗原带着色的深浅，可以将结果分为阴性 可疑和阳性 可以抗原带着色的深浅 结果 无色 阴性 着色非常弱 可疑 着色中到较强 阳性 着色与质控带强度相同 强阳性 风险评估 一般 防范措施 认真细心工作，做好质控 应急方案 提前做好试剂准备工作和做好仪器维护工作，如仪器出现故障不能正常工作，请大理州医院协助完成我科标本。 临床科室 专家意见 同意开展 所需仪器 试剂三证资料 （请附所需仪器、试剂三证） 有 拟收费标准 及效益分析 （是否按卫生与物价行政部门收费标准执行） 是 申请科室意见 科主任签名： 年 月 日 医务科审核 意见 医务科主任签名： 年 月 日 院领导审核 意见 主管院领导签名： 年 月 日 注：1、申请表由科室统一保存； 2