快捷的定点突变效率近100%的大引物PCR方法.pdf

第 卷 第 期 ! ! # 3678! .68# ! 青 岛 大 学 医 学 院 学 报 年 月 $%% $ 9:;= $%% ! ’()’ ’(’*+,-’+,+*-(-.’+ /-.0*’1 2.-3+45-)’)-5 ? 转基因小鼠的构建与鉴定 SIA# # $ # $ 刘晓蕾 #侯琳 #蒋正尧 #葛银林 # 青岛大学医学院!山东 青岛 生理学教研室 生物化学与分子生物学教研室$ # $@@%$# # $ ! ! ! ! ! ! !摘要 目的 构建和鉴定携带有外源 基因的转基因小鼠%方法 将 基因的 与动物表达 SIA# SIA# M*.’ ! ! ! 载体 连接!构建 重组质粒!酶切’测序鉴定正确后!以显微注射法把线性化重组质粒注射到小鼠 +9AR:6 +9ASIA# O O 受精卵的雄原核中!并将受精卵移植到受体鼠的输卵管中产出转基因小鼠!通过 ’ 杂交等方法确 E(4 56=IP:R;76I 立阳性整合有目的基因的 代小鼠%结果 成功构建了 重组质粒!将其显微注射到小鼠受精卵中!得 0 +9ASIA# % ! O 到 代小鼠! ’ 杂交确立了 只整合有 基因的首建鼠%结论 基因可整合到小鼠体 0 E(4 56=IP:R;76I ! SIA# SIA# ! % 内!得到的转基因小鼠为研究 基因的生物学功能提供了动物模型% SIA# !关键词 小鼠!转基因 !重组 基因 *.’ SIA# ! !中图分类号 !文献标识码 !文章编号 # $ /QC ’ #@$A!!QQ $%%%#A%%#$A% ! ! !