瑞氏木霉分子生物学研究进展.pdf

菌物系统19(1)：147～152。2000 h每eos辩证粥# 璃氏本霉分子生物学霹究进展 汪天虹吴静邹玉霞 (出表丧擎赣生耱技术蕊索燕点舞赣察济南250}∞} 摘嬖：臻聂木霉(扛趟。出，燃#，辨群疗是瘩然舆中磐遍存在井嚣重要经满意义触一种丝按真 越。从瑞氏木霉的转化系绽、基韪竞匿、基因袅达调控、过煮产生同源和异源重组蛋白等方面 对瑞氏木霉分子生物学研究进展情况进符了综述， 燕键词：瑞氏木霉，丝状真菌，转化系统，箍因赢隧．筵因袭达调控，重组蛋白 中霉分粪号：Q933文献标识砖：A 熬杖囊毽翔￡女融，嘏s鼬是在各种气镞书麴±壤中普追存在的一静多缨貔真菝擞生姆，其中的一 避。作为一种腐生真菌，瑞氏术霉能羊唾用多种碳源秘氯潦生长。这种代鞋多样性搿盛翦具有的多条生物 台戚岛降群途径，捷稃瑞氏永霉羹有产生多种帮壤辩敬缀拽谢产耪静能力。潜对，由于瑶蠡本鬈辫典骞 懿靛毋的势荽多释走努子赞覆撵解酶类辩能力，璃端袋本蒜棒搀工韭藿糖生产势簿事疑棱餐糖瓣懿簿 粪，钰捂纾维煮酶。睾纾维素酶鞋及蛩鑫穗、淀糟酶等，穗毒多年历史。瑞菠本霉具有救好的台戒蓉翻朔 势泌蒜白的毙力，如它所产生的～种主要的奸雅索麟一好维=糖水解辩I(cel】obiohYd酬ase1)，幽单拷贝 基因编码，产量可选瑞氏术莓胞外分泌性萤白总鬣的50％(DIlra】m，P』of．．1 瑞氏术霉舆有真校的分泌机制，根可能迸具有笥哺乳动物系统榴似的蛋白修饰性能，如：商甘鳝糖翟和 较最熟，这些都往进了对瑞＆术霉酶遗传袭遣。掏建璃螽术霉王妊纯重缓蛋自生产莲拣赫遗抟工程辨发 麓，鸯强潦或异源努荽性蛋如的产生提供r一象符之枣效的选经。 cd瑚口)等模式真菌而言，瑞氏术攀 朝对予掏巢曲霉(却e谤f?冉辫”剐“岛ws)．搬挺然豫麓(弛“，o妒o，4 是起步研究较魄的一种丝靛真菌，但在近十年来，对其势子生物学研究进展迅速．研究便I重点主要集中 在术穗纤维素降簿代谢酶类的竟隆、表达．调控E。率文试胰瑞陵本霉的转他系缝、基西竟隆、基霹表送 调控、进薰产生碡蒜和弊源燕组簧自等方蔷对媾氏拳霉势子盘糖擎研究避展稽疆谶荐综述。 1转纯慈统 1．1营养缺麟型究耍棣 拄璃黄泰霉审还没有撵巅耱瞽遍赢篇瓣营莽缺陷墼变变转。翔esf1947)、淑越越群n 蘸酸线穗熬酸她营养软黪型突变撩。篱墼糖燕酸的突变株艟教有救地寓豢培养。将漩突变栋避～步置 于补加鸟氯醴。瓜氯酸或糖氯酸的MM葡萄糖培养基上培粹，筛选需要瓜氪酸才能生长的克曦株(认为 鼹a嘴B一)用于进行转化实验，将需簧色氨酸的突变株进一步蛩于补加邻氨基荤甲酸、吲哚或色氨酸的 川平板七培养．挑选黹要吲哚才能生长的竞随作为神c窝室株。 基盒疆目：星家骞熟辩掌基金{顼秘编号；∞77∞{2， 收稿日期：1998咖曲15，骼璃日期z1988一11—26 万方数据 s“jducn EⅧl：wrH@lIfe 菌 物 景 统 9卷 l。2载体和转{l：纂绞 一个毒鼓的转化系统的建立，使碍在璇＆本攀串进行离繇和异搋摹禹表达的弭究成为可能。瑞氏术 霉转他系烧与其它墼状粪燕转{￡系境基本糍钕。一般使鬻细藩来源游蠡粒枸建的载体。捌角r糟P涮营 基霞，未见毫鼹源椽记系臻靛报道。她辨，栗焉鼙牲标记鸽遣榉系巯已经建立，琶括挠性筛选：利用带有 对蘸基糖管类抗生素拓潮霉素B秘(并{8抗性筋摹露、赋予对金属稽靛寓苹霉索抗睫曲基因，鞋及对夫环 转讫系统率，戳a瑚ds基嚣或蒲草霉素抗链等为鼙性选择标记的系筑可应用于任何种类木罄，而戳营养 缺褡型如阉描为基础的转讫系统，盔鞴面沈较局限，强能与at馨B一营养缺豁型瑞氏术霉菌株互补。但这 两类转{艺俸幕的转化率都较高，可选100～6∞个，¨g(转亿子：转诧D小n)。 钙作用下进行质粒或DN鱼芹段莳转诧。经过原生质体蒋生后在选择性培彝基上筛选转化子。在I．o～ 1 2mol，L由黎醇存在f，瑞氏禾霉豫生质体的再生率可达90％。 高，可选绚80％。发现转化D】蚺整合到染色体上几个不同的位点，通常以多拷贝的重复形式在瑞氏术霉 基鞭组中存在。肄致转化DNA整畲到染色体上的机制包括同源重组和非同繇照纽。同源重组产生两