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Cyagen的无程序冻存液 无需程序降温，-80℃一步冻存、 无血清、无任何蛋白； 高复苏率90% 不影响干细胞的特性；细胞增殖不改变、细胞 分化不改变； 容易使用、稳定性高 可以直接使用，无需任何的操作 冻存过程中细胞环境稳定，无温度波动 干细胞的冻存 冻存流程： 1、选择处于对数生长期的细胞，按照常用的方法收集细 胞于试管中，计算细胞数量。 2、离心收集的细胞（参考离心条件：4℃，250g，3-5分 钟），吸去上清液。 3、加入适当的冻存液到离心管，缓慢混合均匀，制成细 胞混合液。细胞冻存浓度约为105～106Cells/ml。 4、将离心管中的细胞混合液分装至已做标识的冻存管。 5、将分装好细胞的冻存管直接放于-80℃冰箱，24h后可 以移入-196℃液氮中长期保存。 干细胞的复苏 复苏流程： 1、准备好相应的细胞培养液，平衡至室温；往离心管中 加入6-8mL细胞培养液。准备37℃水浴。 2、从-80℃冰箱或液氮取出冻存的细胞，迅速放入37℃ 水浴中快速晃动，待冻存悬液完全溶解后，往冻存管中 加入1mL细胞培养液，稍微吹打后立即将细胞混合液移 入装有细胞培养液的离心管中，混合均匀。 3、离心收集的细胞（离心条件可参考细胞冻存方法）， 尽量移去上清液。 4、加入细胞培养液重悬细胞，制成细胞悬液，按各自实 验所需密度接种至细胞培养器具中。 我们的合作伙伴： 非常感谢大家对我们的关注！ 干细胞应用研究 赛业（广州）生物科技有限公司 干细胞研究为什么引起这么大的重视 肌萎缩侧索硬化病 (ALS) Alzheimer’s Disease 造血干细胞移植 我国白血病的年发病率为4/10万人，每年新增 约4万名白血病患者, 其中约2万名是儿童。 我国长江流域以南的两广和云贵地区的地中海贫 血的发病率高达10%以上,广东省每年新增重度 beta-地贫患儿400名。 一些重度自身免疫性疾病,如红斑狼疮,多器官硬 化等发病率更高。 造血干细胞移植存在的问题 移植后造血恢复缓慢 移植物抗宿主病(graft-versus-host disease, GVHD)是骨髓移植(BMT)后出现的 多系统损害(皮肤、食管、胃肠、肝脏等)的全身 性疾病，是造成死亡的重要原因之一。 间质干细胞的临床应用 促进造血和免疫功能重建 治疗GVHD 心脑血管疾病 免疫系统疾病 间质干细胞（MSC）的优点 间质干细胞在骨髓中就是造血干细胞的支持细胞 MSC的低免疫原性 MSC的免疫调节作用，降低免疫应答 MSC诱导免疫耐受 MSC表达多种趋化因子受体，体内可趋化迁移 到受损组织和器官 间质干细胞促进造血恢复和免疫 重建，降低GVHD 前期动物试验显示: 1. MSC促进受体鼠的外周血白细胞、血小板、淋 巴细胞的明显恢复； 2. 帮助胸腺、脾脏的结构重建，加速T细胞恢复 3. 降低GVHD的发生率及严重程度 MSC治疗慢性GVHD的临床试用 MSC治疗难治性cGVHD的临床试用 治疗慢性GVHD病人10例，其中7例病人的口腔溃疡、皮 疹、肝功能异常、关节酸痛等症状有明显好转。 MSCs输注量: 异体MSCs数 自体MSCs数 脐血输注量： 有核细胞 CD34+细胞 4×106/kg 8×106/kg 6 ×107/kg 5×105/kg MSC输注对移植物抗宿主病的疗效 间质干细胞的其他临床应用 缺血性心脏病，如心肌梗死 缺血性脑病，如脑梗死，缺血缺氧性脑病 肝脏疾病，如肝纤维化 肾脏疾病，如急性肾衰 组织工程 应用 纳米材料： 成骨诱导，表面 结合DEX-Vc 与纳米材料结合软骨细胞 组织工程存在的问题 细胞和材料的相容性问题 细胞对材料表面的要求 材料的生物安全性 细胞来源安全性问题 组织生长的调控 细胞在材料内部的功能性恢复 临床使用上面的相容性问题 良好的生物材料的要求 1、生物相容性：组成和结构与人体相应组织相 似，无免疫排异原性，良好生物相容性及组织相 容性，能与宿主组织愈合，诱导再生性修复。 2、生物力学顺应性：满足应用场合的生物力学 要求。 3、生物降解性：能按需要降解，做到随再生组 织的生长而作顺应性降解，使组织的生长与材料 降解同步。 4、材料表面或者材质能够植入后，在原位诱导 组织再生。 骨组织相容性的检测 神经干细胞的临床应用 脊髓损伤 缺血性脑卒中 神经元退行性病变，如ALS、帕金森病等 胚胎干细胞的临床应用 无限增殖、多向分化潜能 目前还存在较多的问题，主要是在动物实验阶段。 目前关于胚胎干细胞治疗相关动物模型的实验研 究较多，如帕金森病等。 胚胎干细胞其他应用 建立胚胎干细胞的体外分化模型 建立各种基因改变的胚胎干细胞系, 以