实验1-薄层色谱和纸色谱.ppt

* * 实验一 纸色谱和薄层色谱 杨俊 致知楼 #1574/1531 Email:junyang@snnu.edu.cn 基础有机化学实验 学习色谱法的原理 掌握薄层色谱和纸色谱分离和鉴定化合物操作 实验目的 利用混合物各组分在固定相和流动相中的分配平衡常数的差异进行分离。当带有样品的流动相流经固定相时，由于固定相对各组分的吸附或溶解性能的不同，使吸附力较弱获溶解度较小的组分在固定相中移动速度较快，经过多次反复平衡，将混合物中各组分分离。 色谱法的一般原理 按操作分：薄层色谱、柱色谱、纸色谱、气相色谱和高效液相色谱 按原理分：吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱和凝胶渗透色谱 薄层色谱 薄层色谱：薄层色谱 (Thin Layer Chromatography)，常用 TLC 表示，是一种微量，快速和简便的色谱方法。一般是将固定相，如硅胶和三氧化铝，负载在一张薄层板上，将样品置于固定相之后，流动相通过毛细管效应从下往上流动而使样品分开。 TLC 是有机化学实验室中使用的非常多实验操作，常常用来检测反应和柱色谱前判断使用展开剂的极性。 薄层色谱实验药品和仪器 药品： 偶氮苯，苏丹红，混合物 (自配)，环己烷/乙酸乙酯 = 9:1 仪器： TLC板，毛细管，广口瓶，铅笔 1 cm 1 cm 1. 准备TLC板 2. 展开 展开剂：环己烷/乙酸乙酯 = 9:1 3. 干燥、显色 自身有颜色 有共轭体系的使用紫外灯 各种显色剂 4. 计算 Rf 值 Rf = D1/D2 5. 分析结果 通过比较 Rf 值，确定混合物中各组分分别是什么物质 纸色谱 (Paper Chromatography) ：纸色谱法是以纸作为载体的色谱法。按分离原理属于分配色谱法的范畴。固定相一般为滤纸纤维上吸附的水分，流动相 (展开剂) 为有机溶剂。 纸色谱实验药品和仪器 药品： 甘氨酸，亮氨酸，混合物 (自配)，展开剂：水/正丁醇/醋酸 5:4:1，取上层液体 仪器： 滤纸，大试管，带钩塞子，铅笔 实验操作类似于TLC 展开装置图 两张色谱滤纸，分别点上甘氨酸/ 混合物; 亮氨酸/混合物 使用茚三酮乙醇溶液进行显色 通过比较 Rf 值确定混合物中各 组分。 薄层板 (1) 二块 15×3cm 玻片，洗净，控水 (2) 调糊：3g硅胶G和8mL0.5%羧甲基纤维素钠水溶液在小烧杯中搅匀 (3) 用小勺取适量于玻片上粗铺平，手指轻弹玻片，反复数次，使糊 状物均匀地铺在玻片上于室温下晾干，每人铺二块 (4) 活化：将晾干的薄层板放在烘箱中，待烘箱温度升至 105-110oC， 计时30分钟 干板 湿板 平铺法—简易平铺法 浸渍法 制板：简易平铺法 *