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实验十四 薄层色谱和纸色谱
14.纸色谱和薄层色谱 15.减压蒸馏 16.乙酰乙酸乙酯的制备及性质试验(一) 17.乙酰乙酸乙酯的制备及性质试验(二) 18.局部麻醉剂“苯佐卡因”的制备及波谱鉴定(一) 19.局部麻醉剂“苯佐卡因”的制备及波谱鉴定(二) 20.局部麻醉剂“苯佐卡因”的制备及波谱鉴定(三) 21. -苯乙胺的制备及拆分(一) 22. -苯乙胺的制备及拆分(二) 23. -苯乙胺的制备及拆分(三) 24.酚、醛、酮及胺的化学鉴定 25.羧酸及其衍生物的化学鉴定 26.糖、氨基酸及蛋白质的化学鉴定 27.甲基橙的制备 本学期实验目录 实验目的 学习色谱法的原理 掌握使用薄层色谱和纸色谱对化合物进行分离和鉴定 碳酸钙 石油醚/乙酸乙酯 色谱 1906 年 俄罗斯化学家 Mikhail Tsvet 色谱法的一般原理 利用混合物各组分在固定相和流动相中的分配平衡常数的差异进行分离。当带有样品的流动相流经固定相时,由于固定相对各组分的吸附或溶解性能的不同,使吸附力较弱或溶解度较小的组分在固定相中移动速度较快,经过多次反复平衡,将混合物中各组分分离。 薄层色谱 薄层色谱:薄层色谱(Thin Layer Chromatography),常用TLC表示,是一种微量,快速和简便的色谱方法。一般是将固定相,如硅胶和三氧化铝,负载在一张薄层板上,将样品置于固定相之后,流动相通过毛细管效应从下往上流动而使样品分开。 TLC是有机化学实验室中使用的非常多实验操作,常常用来检测反应和柱色谱前判断使用展开剂的极性。 薄层色谱实验药品和仪器 药品: 偶氮苯,苏丹红,混合物(自配),环己烷/乙酸乙酯 9:1 仪器: TLC板,毛细管,广口瓶,铅笔 0.5 cm 0.5 cm 1. 准备TLC板 2. 展开 展开剂:环己烷/乙酸乙酯 9:1 3. 干燥、显色 自身有颜色 有共轭体系的使用紫外灯 各种显色剂 4. 计算Rf值 Rf = D1/D2 5. 分析结果 通过比较Rf值,确定混合物中各组分分别是什么物质 纸色谱 纸色谱(Paper Chromatography):纸色谱法是以纸作为载体的色谱法。按分离原理属于分配色谱法的范畴。固定相一般为滤纸纤维,流动相(展开剂)为有机溶剂。 纸色谱实验药品和仪器 药品: 甘氨酸,亮氨酸,混合物(自配),展开剂(水/正丁醇/醋酸 5:4:1,取上层液体) 仪器: 滤纸,大试管,带钩塞子,铅笔 实验操作类似于TLC 展开装置图 两张色谱滤纸,分别点上甘氨酸, 混合物,以及亮氨酸,混合物 使用茚三酮乙醇溶液进行显色 通过比较Rf值确定混合物中各 组分。 * *
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