最大吸收峰.ppt

双组分混合物中某一组分的测定，可选择两个适当的波长，在这两个波长处干扰组分具有相等的吸光度，因而可达到消除干扰的效果。 若 , 则 例1：2,4,6-三氯苯酚存在下苯酚的测定 ?1＝270 nm ?2＝286 or 325 nm 双波长分光光度计的改进 差示信号： ΔS＝K1Aλ1－K2Aλ2 Aλ1＝aλ1＋bλ2 Aλ2＝aλ2＋bλ2 ΔS＝K1(aλ1＋bλ2) －K2( aλ2＋bλ2) ＝(K1aλ1－K2aλ2)+(K1bλ1－K2bλ2) 若测定混合物中的A，消除B的干扰， 调节仪器的信号放大器，使 K1bλ1－K2bλ2＝0 ΔS ＝K1aλ1－K2aλ2 （3） 三波长光度分析法 基本概念 净A2和分析成份浓度的关系 三波长光度法分析的应用 例： Sc－氨基酸偶氮膦 La－氨基酸偶氮膦 测La。 (4) 导数吸收光谱分析 （Derivative Spectroscopy) 导数吸收光谱理论 在双波长光度计上，如使用的两波长?1和?2很接近，进行同时扫描，并保持两波长差Δ?不变，便可获得一阶导数光谱。 ΔA＝A?1－A?2 导数光谱即吸光度随波长变化率对波长的曲线。 对n阶导数而言 导数光谱 导数吸收光谱分析的优点: （1）导数光谱较原吸收光谱谱带变窄，故其减少了与干扰谱带交叠的可能性，减小干扰。 （2）吸收光谱分析的背景光都为斜线，斜线一阶导数为常数的，二阶导数为0，故可消除背景干扰。 吸收曲线峰值处 导数信号与被测物浓度c的关系 当 时，上式为： 导数光谱的获得 1、 电子学方法 （1）电子微分法 用RC微分电路将仪器的输出信号(I)对时间(t)微分得到(dI/dt) 2、光学方法 （1）双波长分光光度法 在波长间隔足够少 （2）波长调制 是目前最广泛应用于获得导数光谱的技术，最常见的是正弦调制。 在吸收光谱中，透过光强度是波长的函数，若在给定波长?0处用泰勒收敛展开，则有： 式中d为振幅，ω为调制频率，写成正弦和余弦的倍角形式得： 在sin(ωt)的振幅中包含I(?0)的n阶导数项（n为奇数），当d值很小时，In(?0)以外，d的其它高次方项可以忽略。此时sin(ωt)的振幅与I(1)(?0)成正比。同样，cos(2ωt)的振幅与I(2)(?0)成正比……依次类推。同时只需将透过光中所含的sin(ωt)，cos(2ωt)……等的信频成份进行检波，即可得到相应的一阶，二阶……等导数信号。 调制方法 使波长呈周期性变化，使波长振荡 导数曲线的波型特征 1、奇阶导数 2、偶阶导数 3、导数阶数的增加，谱带越加变锐，带宽变窄 4、谱带的极值随导数的阶数增加而增大 四、导数的光谱求值方法 1、峰谷法 2、基线法（或正切法） 3、峰零法 导数光谱的分析应用 1、白蛋白的分析 2、工业废水中苯胺和苯酚的同时测定 I0为常数 二阶导数方程式的推导： 三阶导数方程式的推导： 由： 得： 光强对波长的二阶和三阶导数与浓度成线性关系。 推广到n阶： 当 时 令波长扫描速度d?/dt为常数k （2）数值微分法 将谱线数据以数值形式表达并用电子计算机进行原始数据的平滑、平均和微分等数值处理，然后输出导数信号。 在扫描时保持Δ?为k 当表示为时间函数，即以 即 图 吸收光谱曲线（a）及其1阶至4阶导数曲线（b－e） 图 导数光谱的图解测定法 第九章课后习题 p258-259 * * （3） pH的影响 如果化合物在不同的pH下存在的型体不同，则其吸收峰的位置会随pH的改变而改变。 苯胺： 苯酚： 二、紫外-可见分光光度计 1、仪器的基本构造 由光源、单色器、吸收池、检测器、信号处理和读出装置五部分构成 2、仪器类型 主要有：单光束分光光度计、双光束分光光度计、双波长分光光度计和多通道分光光度计 （1）单光束分光光度计 光源 单色器 参比池 检测器 试样池 （2）双光束分光光度计 光源 单色器 参比池 检测器 试样池 斩光器 （3）双波长分光光度计