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第4单元核酸-生物化学与分子生物学精品课程
第4单元 核酸
名词解释
1.增色效应(hyperchromic effect); 2. 分子杂交(molecular hybridization); 3. 聚合酶链式反应(PCR)denaturation and renaturation of DNA); 5. Tm; 6. 内含子与外显子
(二)填充题
1.核酸分子中糖环与碱基之间为 型的 键核苷与核苷之间通过 键连接成多聚体。Z-DNA为 手螺旋。
5.hn-RNA是真核生物 的前体。
6.用Sanger的链末端终止法测定DNA一级结构时,链终止剂是 。
7.维系DNA双螺旋结构稳定的力主要有 和 。
8.在碱性条件下, 核酸比 核酸更容易降解,其原因是因为 核酸的每个核苷酸上 的缘故。
(三)选择题(在备选答案中选出1个或多个正确答案)
1.有关核酸的杂交
A.DNA变性的方法常用加热和碱变性
B.相同来源的核酸才能通过变性而杂交
C.不同来源的核酸复性时,若全部或部分碱基互补就可以杂交
D.杂交可以发生在DNA与DNA之间,RNA与DNA,RNA与RNA之间
E.把待测DNA标记成探针进行杂交
2.DNA的性速度与以下哪些有关A温度 B.分子内的重复序 C.pH D.变性DNA的起始浓度E.以上全部
某DNA分子中腺嘌呤的含量为15%,则胞嘧啶的含量应为A.15%B.30% C.40% D.35% E.7%
4.DNA变性是指
A.分子中磷酸二酯键断裂 B.多核苷酸链解聚C.DNA分子由超螺旋→双螺旋 D.互补碱基之间氢键断裂E.DNA分子中碱基丢失
DNA分子多为负超螺旋。
2.RNA分子可以发生热变性,并有增色效应水分子可以插入天然DNA分子双螺旋空隙中。从结构基因中DNA序列可以推出相应的蛋白质序列。B-DNA的结构特征。
2.何谓Tm?影响Tm大小的因素有哪些?在实验中如何计算Tm值?
3.如果人体有1014个细胞,每个体细胞的DNA量为6.4×109个碱基对。试计算人体DNA的总长度是多少?是太阳-地球之间距离(2.2×109公里)的多少倍?已知双链DNA每1000个核苷酸重110-18g,求人体的DNA的总质量。什么是DNA变性?DNA变性后理化性有何变化?不同的DNA片段之间,DNA片段与RNA片段之间,如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性,形成新的双螺旋结构。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。酶链式反应(PCR)是扩增样品中的DNA量和富集众多DNA分子中的一个特定的DNA序列的一种技术。在该反应中,使用与目的DNA序列互补的寡核苷酸作为引物,进行多轮的DNA合成。其中包括DNA变性,引物退火和在Tap DNA聚合酶催化下的DNA合成。
(二)填充题
1.β,糖苷磷酸二酯′-OH。
(三)选择题
1.(A,C,D)DNA对碱较稳定,因此DNA常用热变性和碱变性。当两条不同来源的DNA(或RNA)链或DNA链与RNA之间存在互补序列时,在一定条件下可以发生互补配对形成双螺旋分子,即杂交分子。分子杂交是常用标记的探针与待测分子杂交。
2.(E) DNA的复性速度与温度,分子内的重复序列,H,变性DNA的起始浓度,DNA长度都有关系的含量15%,的含量应为35%B)因为DNA分子中A-T,G-C配对,所以A=T,G=C,A+G=T+C,A+C=T+G。
8.(A)DNA的Tm值与G-C含量成正比,所以G-C含量最高的,Tm值应最高。
(四)判断题
1.对生物体内负超螺旋DNA容易解链,便于进行复制、转录等反应。 错错真核生物的结构基因中包括内含子和外显子,经转录、加工后只有外显子部分翻译成蛋白质,与蛋白质氨基酸序列相对应。RNA可形成局部双螺旋,两链之间是反向平行的。
(五)分析计算题
1.(1)两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕形成右手螺旋;(2)嘌呤和嘧啶碱位于双螺旋的内侧,磷酸和核糖在外侧,彼此通过3′,5′磷酸二酯键相连接,形成DNA分子的骨架。碱基平面和纵轴垂直,糖环的平面则和纵轴平行;(3)双螺旋的平均直径为2nm,两个相邻的碱基对之间相距的高度,碱基堆积距离为0.34nm,两个核苷酸之间的夹角为36度;(4)两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成的氢键相联系而结合在一起;(5)碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制。
2.DNA的变性从开始解链到完全解链,是在一个相当窄的温度范围内完成的,在这一范围内,紫外线吸收值的增加量达到最大增加量的50%时的温度为DNA的解链温度(溶解温度,melting temperature,Tm)。
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