第8章病原学诊断与防治.ppt.ppt

?快速、冷藏送检 ——对少数菌要保温送检（如脑膜炎球 菌、淋球菌等） ?有特殊要求的细菌（如某些严格厌氧菌等） 必须在特殊条件下送检和保存。 C. 其他显微镜: 适用不同观察目的 暗视野显微镜 相差显微镜 荧光显微镜 共聚焦显微镜 3、抗原检测（detection of bacterial antigens） 用已知Ab检测待测Ag： 特点：特异性强、敏感性高，Ag的检出与病原菌的死活无关 4、其他检测： 代谢产物的检测： 如气相色谱法鉴定厌氧细菌 PCR检测核酸 基因芯片 病毒的细胞培养 特点: A. 对多种病毒敏感 B. 生长能力有限, 获取成本高 C. 可携带潜伏病毒 1.细胞病变效应( cytopathic effect, CPE) Cytopathic Effect 反义寡核脱氧核酸（asODN） 反义寡核苷酸（asON） 核酶（ribozyme） siRNA（small interfering RNA） 合成反义RNA或DNA、核酶等所需成本费较高。 制剂不稳定，易被核酸酶降解。 如何使制剂能有效地到达靶细胞内的病毒基因。 迄今，被批准进入临床研究的只有针对抗巨细胞病毒的反义核酸，局部用于巨细胞病毒感染的脉络膜炎及视网膜炎。 (3) 传代细胞培养 特点: A.对多种病毒敏感性高 B. 繁殖能力高,传代时间长 C. 有致癌危险，不能用于疫苗生产 Cytopathic effect of enterovirus 71 and HSV in cell culture: note the ballooning of cells. (Virology Laboratory, Yale-New Haven Hospital, Linda Stannard, University of Cape Town) (二) 病毒在细胞中增殖的指标 病毒感染细胞 发生形态改变 Syncytium formation in cell culture caused by RSV (top), and measles virus (bottom). （2）病毒感染细胞 与邻近细胞融合 （3）形成包涵体（inclusion body） Cytopathic Effect Syncytial formation caused by mumps virus and haemadsorption of erythrocytes onto the surface of the cell sheet. 2. 红细胞吸附（hemadsorption, HAd） 病毒包膜表面血凝素（HA）＋ RBC表面HA受体 3. 干扰现象（interference） 风疹病毒＋人胚肾细胞 病毒增殖，CPE（－） 埃可病毒＋人胚肾细胞 病毒增殖，CPE（＋） ＋人胚肾细胞 风疹病毒？ 埃可病毒 CPE(-)——风疹病毒(+) 埃可病毒(-) CPE(+)——风疹病毒(-) 埃可病毒(+) 4. 细胞代谢改变： 病毒增殖，细胞代谢变慢，pH变化减慢 (三) 病毒定量测定 血凝试验： 病毒总量（活病毒+死病毒） 蚀斑测定（plaque） ： ID50或TCID50 (50%组织细胞感染量)： 感染性病毒量 (一) 标本的采集 浅部感染真菌：表层皮损组织（用70％酒精消毒） 深部感染真菌：体液、分泌物、排泄物等 (二)检查与鉴定 1、直接镜检： 查孢子、菌丝 表层角质标本：用10％KOH微加热后镜检 体液、分泌物、排泄物： 离心后染色镜检 第三节 真菌学诊断 2、分离培养： 标本处理 大培养 小培养 菌落特征观察 观察菌丝 孢子特征 鉴定 生化反应或 分子生物学技术 沙氏培养基 3.动物试验 4.皮肤超敏反应试验 （三）真菌学快速诊断 检测真菌Ag 、 Ab 检测真菌核酸 检测真菌毒素 一、人工主动免疫 用人工的方法将疫苗或类毒素等抗原性制剂 接种于人体，使机体获得特异性免疫力。用于预 防。 主要生物制品: 死疫苗 活疫苗 类毒素 基因工程疫苗 转基因植物疫苗 亚单位疫苗 DNA疫苗 重组载体疫苗 合成疫苗 第四节 特异性预防与治疗