放射免疫分析质控.ppt

河北省医学影像学质量控制会议 放射免疫分析的质控与临床应用 河北医科大学第三医院 黄建敏 1960年美国学者Yalow和Berson创立了放射免疫分析,并因此在1977年获得了诺贝尔医学奖! 相关管理规则 自70年代起,放免技术广泛应用 为了规范放射免疫分析试剂盒的生产和销售,我国在1989年4月颁布了放射性药品管理办法,1995年12卫生部药政局颁布了放射免疫分析药盒通则 同时为了使放射免疫分析的结果更为准确、操作行为更加规范，各地也出台了相应的质控手册等 主要内容 误 差 的 种 类 产生误差的主要原因和控制方法 内部质量评价 外部质量评价 用于评价系统误差的指标称为偏倚（bias），而在体外放射分析中更多的使用准确度（accuracy），是指：测定值与真值的一致程度 评价随机误差的指标称为精密度(precision),指在一定条件下，由一种实验方法对某一样品多次重复检测时所得结果的一致性 产生误差的主要原因 1.仪器和设备对误差的影响 关于放射性探测仪应注意一下几点 仪器是否在最佳公作条件下工作，例：用测131I的条件测125I就不妥 测量的误差：样品的放射性活度过低，则使误差增大；本底同样对测量结果产生影响 生物样品也是引进误差的常见原因：例：对于能量较低的125I来说，管壁的自吸收现象 离心机的使用 一般的离心机只通过转速来表示工作状态，而忽略了半径对离心力的影响，因此建议将每分钟转速转换为相对离心力，其公式为： RCF=0R×N2 温度同样会对离心产生影响 一般控制在40C为宜 混匀器 使用混匀器的目的是使参加反应的试剂能够充分的混匀，应加注意的是防止将溶液溅出管外造成损失，引起误差 质量控制样品：实际工作中只利用标准曲线而不用质量控制样品的现象并不少见，这样会使样品测定值发生变化而难以觉察 其它试剂：例如体外分析常用双蒸馏水或去离子水及缓冲液，其质量是否合格？ 2. 玻璃容器及加样器具对误差的影响 由于体外放射分析是微量 操作技术，所以所使用的 移液枪除应校准其容量外， 还应观察其气密程度；而 操作中更应注意其正确的 排液方式及是否存在气泡 的影响 3. 试剂对误差的影响 标准品：不同的试剂盒对标准品的组装方案不同，应认真区分并尽量取样准确，例，类固醇激素只能用选定的稀释液来稀释 标记物：随时间延长，应考虑到放射元素的脱标和物理衰变的影响，而放射性浓度较高则可能因“衰变损伤”导致配体分子免疫活性下降 结合剂：保存不当是使结合剂质量下降的主要原因，因此“不能反复冻融；一旦稀释，一次性使用” 分离剂：足量以供在一定时期内连续使用，如需更换，必须鉴定，因即使是同一厂家同一批次其性能也可有所差别 4.生物样品的采集与制备 生物样品的采集应注意以下几点： 体位：例：对血浆肾素活性测定的影响 饮食：例：对基础胰岛素水平的影响 时间：例：昼夜对对皮质醇和ACTH的影响 机体状态：例：应激对皮质醇和ACTH的影响 性别.年龄.月经周期：例：对性激素水平的影响 药物：例：氢氯塞嗪对血清醛固酮的影响 生物样品的制备: 目的:适于检测方法的需要而同时保存 分析物在在生物样品中的本来面目而不出现可以影响检测结果的任何变化 例如：是否需要抗凝？用何种抗凝剂？不能马上检测是否需要离心？保存的温度如何？避免溶血！等等！ 5. 操 作 操作技术不熟练是产生随机误差的主要原因，其中加样环节尤其重要!加样速度是否均一，移液枪的使用是否规范？所用容器等是否清洁或受到污染？离心的时间、速度、分离剂的量、离心后至分离上清液的时间、吸取上清液的技巧等等 6. 数 据 处 理 关于标准曲线拟合方式的选择: 虽然其目的是最佳反映出剂量和效应的关系，但目前没有任何一种拟合方式能最佳的满足所有的检测系统，因此，需要去选择！ Logit Y=a+b·log X 优点：常用、计算简单、使用方便 缺点：有一定的偏离，特别是线性两端 3/2次方曲线回归或 logit Y=a+b·logX +c（logX）2 +d （logX）3 优点：真实性强 缺点：计算复杂，不易发现并舍弃坏点 WHO 推荐四参数logistic法 其适应性强，但计算复杂 但目前的放射免疫分析系统自带的软件 能够对拟合方式作出最佳的选择！ 7.解释和评价 单位的统一：最好使用国际制单位并统一起来 正常值及正