LAMP法鸟类性别鉴定的研究与应用.pdfVIP

12 李巍：LAMP法鸟类性别鉴定的研究与应用 2017年第3期 LAMP法鸟类性别鉴定的研究与应用 3，刘 佳1’2， 李 巍L2，杨 卓1’2，陈明非1’2，高东梅 1，2 苍真伟1’2，程淑晶1’2，王德强 (1．辽宁省大连市畜牧总站，辽宁大连116037； 2．辽宁省大连市动物疫病预防控制中心，辽宁大连116037 3．大连老虎滩海洋公园鸟语林，辽宁大连116015) 摘要：本研究利用鸡w染色体中EEO．6序列上的EcoR片段为靶序列，进行引物设计，建立了基于LAMP法的 快速鸟类性别鉴定方法。试验表明，该引物可用于多属种鸟类的性别鉴定，在64℃条件下，60min即可完成检 测。同时利用实时浊度法和荧光目视法两种LAMP检测法对体系进行了敏感性试验，并与PCR方法进行比较，实 时浊度法与荧光目视法敏感性相近，是PCR方法的100倍。方法建立后，在大连老虎滩鸟语林进行了11目14科35 种鸟类的性别鉴定临床试验，符合率为100％。 关键词：LAMP；鸟类；性别鉴定；实时浊度法；荧光目视法 中图分类号：$859．84 文献标识码：B Researchand ofLAMPinbirdsexidentification application LiWeil一，YangZhu01”，ChenMingfeil一，GaoDongmei3，LiuJial一， Zhenweil一，ChengShujin91一，WangDeqian91，2 Cang Dalian (1．DaLianAnimal 116037： HusbandryStation，Liaoning 2．DaLianCenterforAnimalDiseasePreventionand DalJan116037 Control，Liaoning 3．DaLianLaohutanOcean DalJan ParkNiaoyuLin，Liaoning116015) Abstract：InthiS test wasestablishedbasedon Isothermal study，arapid assay Loop—Mediated the were EE0．6 onWchro— designedbytargeting Amplification(LAMP)andprimers pseudogenesequence fromchicken．Thereactionconditionofthedetectionwas andtheresults mosome systemoptimized at64℃for60min．The can showedthatthe e