选修三二轮复习基因工程.ppt

【方法技巧】“四步法”解决基因工程操作程序题 第一步“三辨”：分辨限制酶的种类、识别序列和切割位点。 第二步“三找”：找出标记基因、目的基因及其插入位点。 第三步“一析”：分析目的基因插入质粒后是否破坏了标记基因。 第四步“一理”：理清判断目的基因是否导入受体细胞的方法。一般用含有某种抗生素的培养基培养受体菌，如果有两种抗生素抗性基因，还需判断用哪一种抗生素来检测。 6.(2016·全国卷Ⅰ)某一质粒载体如图所示，外源DNA插入Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamHⅠ酶切后，与用BamHⅠ酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题： (1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有____________________________(答出两点即可)。而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。 能自我复制、具有标记基因 (2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是______________ ；并且____________和________________________ 的细胞也是不能区分的，其原因是__________________________________。 在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落，还需使用含有________________的固体培养基。 (3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自____________。 二者均不含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长　 含有质粒载体　含有插入了目的基因的重组质粒 二者均含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长 四环素 受体细胞（宿主细胞） 4.(2016·海南高考)基因工程又称为DNA重组技术，回答相关问题： (1)在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即_______和从________中分离。 (2)利用某植物的成熟叶片为材料，同时构建cDNA文库和基因组文库，两个文库相比，cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少，其原因是___________ _________________________________________。 (3)在基因表达载体中，启动子是__________聚合酶识别并结合的部位。若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，最常用的原核生物是____________。 (4)将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有________和________颗粒。 人工合成 生物材料 （课本P10） cDNA文库中只含有叶细胞已转录的基因，而基因组文库中含有该植物的全部基因 RNA 大肠杆菌 金粉　 钨粉 5.(2016·天津高考)人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值，只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。 (1)为获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取_____合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框内标出另一条引物的位置及扩增方向。 (2)启动子通常具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是________(填写字母，单选)。 A.人血细胞启动子　　B.水稻胚乳细胞启动子 C.大肠杆菌启动子 D.农杆菌启动子 mRNA B (3)利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需添加酚类物质，其目的是________________。 (4)人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性。与途径Ⅱ相比，选择途径Ⅰ获取rHSA的优势是_______________。 (5)为证明rHSA具有医用价值，须确认rHSA与________的生物学功能一致。 吸引农杆菌移向水稻受体细胞，有利于目的基因成功转化 水稻细胞能对初始rHSA多肽进行加工，而大肠杆菌是原核生物，没有内质网、高尔基体等，不能对初始rHSA多肽进行加工。 天然的HSA 《系统》P119 限时训练 提升考能 2.(2015·四川卷，