(四)4-2细胞工程.ppt

４、细胞融合技术 　　用人工的方法，使不同来源的细胞相互融合，形成一个新细胞，即重组细胞的过程。 细胞融合的概念 因为不同种生物之间存在着生殖隔离，所以用传统的有性杂交方法是不可能做到这一点的。 于是，这些科学家试图用这两种植物的体细胞进行杂交，来实现这一美妙的设想。 番茄细胞和马铃薯细胞融合 杂种植物——薯番茄或番茄薯 杂种植株 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 脱分化 愈伤组织 再分化 植物细胞融合技术的过程 植物细胞的融合 植物组织培养 植物细胞A 原生质体B 原生质体A 杂种细胞AB 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 方法？ 促进融合的方法？ 融合完成的 标志 植物细胞B 去壁的常用方法： 酶降解法（纤维素酶、果胶酶等） 原生质体融合方法： 物理法：离心、振动、电刺激等 化学法：聚乙二醇 (1) (1) (2) (3) (4) (5) 过程示意图 白菜 甘蓝 白菜－甘蓝 植物体细胞杂交应用 动物细胞融合技术 骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 杂交瘤细胞 促融剂 什么是单克隆抗体？ 应用？ ５、细胞核移植技术 鲤鱼胚胎细胞 鲫鱼成熟卵 鲤鲫核质杂交鱼 重组的卵 核移植 细胞核 去核细胞 取核 细胞核 去核卵细胞 去核 细胞核移植装置：显微操作器——显微镜 　　　　　　　　　　　　　　　注射器 细胞核移植操作： ６、胚胎移植技术（选学） 概念 方法和技术：超数排卵 　　　　　　　体外受精 　　　　　　　胚胎移植 　　　　　　　代孕 意义 动物细胞培养 1、过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 （分解弹性纤维） 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 问题： 1、为何细胞在培养瓶中贴壁生长？ 2、为何要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来？ 3、比较动物和植物组织培养所用的培养基的成分 接触抑制 1972年卡尔森等通过两个烟草品种之间原生质体的融合，获得了第一个体细胞杂种。 1978年梅尔彻斯(Melchers)等首次获得了番茄和马铃薯的属间体细胞杂种——“Potamato”。 目前，已得到栽培烟草与野生烟草、栽培大豆与野生大豆、籼稻与野生稻、籼稻与粳稻、小麦与鹅冠草等细胞杂种及其后代，获得了有价值的新品系或育种上有用的新材料。 （二）植物体细胞杂交技术 1、概念：将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 2、优势：（与有性杂交方法比较） 打破了不同种生物间的生殖隔离限制，大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围。 植物细胞工程的实际应用 1、植物繁殖的新途径 1）微型繁殖 2）作物脱毒 3）神奇的人工种子 2、作物新品种的培育 1）单倍体育种 2）突变体的利用 3、细胞产物的工厂化生产 1.微型繁殖 微型繁殖技术:快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。 特点:保持优良品种的遗传特性； 高效快速地实现种苗的大量繁殖。 一、植物繁殖的新途径 (1)材料:无病毒的茎尖。 (2)脱毒苗:切取茎尖进行组织培养获得。 2.作物脱毒 3.神奇的人工种子 (1)技术:植物组织培养。 (2)结构:人工薄膜胚状体或不定芽或顶芽或腋芽。 (3)特点: 保持亲本优良性状； 不受气候,季节和地域限制。 二、 作物新品种的培育 1.单倍体育种 (1)方法:花药离体培养。 (2)优点: 后代稳定遗传,都是纯合体; 明显缩短育种年限。 2.突变体的利用 (1)产生:植物组织培养； (2)利用:筛选对人们有利突变体,进而培育新品种。 三、 细胞产物的工厂化生产 1.种类:蛋白质,脂肪,糖类,药物,香料,生物碱等。 2.技术:植物的组织培养。 单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 核移植技术 克隆羊培育过程 黑面绵羊去核卵细胞 白面绵羊乳腺细胞核 细胞核移植 重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎 胚胎移植 另一头绵羊的子宫 妊娠、出生 克隆羊多利 （1