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本章,我们讨论4个问题: 1. 什么是基因工程——基因工程的概念。 2. 为什么能进行基因工程——基因工程的原理和技术。(包括3大理论和3大技术准备) 3.怎样进行基因工程——3大步骤(DNA体外重组,重组DNA导入宿主细胞后扩增和表达,基因工程后处理) 4.基因工程的应用和前景——对于医学来说即生产基因工程产品、开展基因治疗等。 第一节 概 述 一.现代科学技术发展的3个特点: (一)科学技术加速发展和急剧变革: 1.当代科学发展成指数增长趋势,全世界发表科技论文6000-8000/天,平均1篇/10.8秒问世。 2.人类科技知识在19世纪半衰期是50年,现在是3-5年(终身教育学习)。 3.1973年,Cohen Group第一次实现了细菌遗传性状的转移terr+nersr→terrner ,导致基因工程技术诞生,至今不到30年,人类已经拥有了克隆羊、猪等等的技术,可以复制一个生命体。(克隆羊多利1997-2003,体细胞克隆,胚胎细胞克隆) (二)科学技术发展的综合化 1.19世纪中叶,以科学技术是分离的,它们各有独自文化传统,它们的发展往往是脱节的。 2.科学回答“是什么”“为什么”,技术回答“做什么”“怎么做”。当今科技发展已经密不可分,科学里包含技术,技术里体现科学。 3.当代科技发展有两种形式:一是突破,二是融合。突破是线性的,即从研究开发新一代的科技成果取代原有一代科技成果。融合是非线性的,即混合原有不同的科技领域,进而发展新产品,造成革命性市场,它们是互补和合作的结果。 基因工程既是科学又是技术,既是突破,又是融合。她造成革命性市场(美国基因工程产品300亿美元/年,乙肝疫苗50美元/人);她是分子遗传学,生物化学,细胞学,细胞生物学,分子生物学相互渗透,交叉融合、突破的结果。 (三)科技发展必需和人文社会科学发展相结合: 1.当代各种全球性问题出现,从一定意义上来说是由于科学技术广泛应用于社会而引发的,如TMD、NMD(布什对萨达姆) 2.科学技术是第一生产力,而文化水平是人类把握科学技术的一个尺度。 3.科学技术是一把双刃剑,原子核技术可以给人类带来光明,原子弹却可以把长崎、广岛夷为平地;克隆技术,基因工程技术可以挽救濒临灭绝的动物(国宝熊猫),也可以动摇人类以性爱为基础的生产方式……(冷冰冰克隆人和自然人,×情人节少了一个经济增长点;克隆战争狂人和反战英雄;克隆idea孙悟空齐天大圣)。基因工程技术是当代科学技术重要的前沿。 二.基因工程的概念 (一)基因(gene) 基因 从化学上来说,指的是一段DNA或RNA顺序,该顺序可以产生或影响某种表型(genotype,phenotype),可以由于突变生成等位基因变异体(体细胞父源和母源;正常和突变基因);从遗传学上来说,基因代表一个遗传单位,一个功能单位,一个突变单位。 (二)基因工程(genetic engineering) 基因工程 在体外通过人工剪、接,将不同来源的DNA分子组成一个杂合DNA分子(DNA分子重组体),然后导入宿主细胞去复制扩增或表达。因为通过人工设计,得到一定的设计方案,故称为基因工程。由于整个操作在分子水平上进行,所以也称分子克隆。 基因工程的基本特点是,分子水平操作,细胞水平表达。 在这个过程中: 1.“基因剪刀” 剪取DNA的酶就像一把“基因剪刀” 2.“缝纫针” 连接不同来源DNA分子的酶就像一根“缝纫针”,使二者连在一起 3.“交通工具” 使用载体好比一辆车子 4.“乘客” 有用基因如IL2好比使乘客,车子把乘客送进理想天堂(宿主细胞)去繁衍生息,春华秋实,生产我们需要的产品或开展基因治疗(IL2/LAK→抗癌)。 我们应该记住他们—— 1.第一个实现DNA重组的人-Berg 1972年,Berg用E.coRⅠ切割SV40DNA和λphageDNA,经过连接组成重组的DNA分子。Berg是第一个实现DNA重组的人。 2.第一个取得基因工程成功的人-Cohen 1973年,Cohen Group将E.coli的tetr质粒psclol和nersrR6-3质粒体外限制酶切割,连
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