上课用制作泡菜并检测亚硝酸盐含量.pptVIP

上课用制作泡菜并检测亚硝酸盐含量.ppt

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3、为什么泡菜坛内有时会长一层白膜,这层白膜是怎么形成的? 形成白膜是由于产膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厌氧微生物,泡菜发酵液营养丰富,其表面氧气含量也很丰富,适合酵母菌的繁殖。 4、为什么日常生活中要多吃新鲜蔬菜,不吃存放时间过长、变质的蔬菜? 有些蔬菜,如小白菜和萝卜等含有丰富的硝酸盐。当这些蔬菜放置过久时发生变质(发黄、腐烂)或者煮熟后存放太久时,蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐,危害人体健康。 果酒 果醋 腐乳 泡菜 微生物类型 原理 反应条件 检测方法 酵母菌,真菌,兼性厌氧 醋酸菌,细菌,好氧菌 毛霉,真菌,好氧 乳酸菌,细菌,厌氧菌 酵母菌的无氧呼吸产生酒精 20℃,无氧 重铬酸钾与其反应呈灰绿色 醋酸菌的有氧呼吸产生醋酸 30~35℃,通入氧气 品尝、pH试纸检测 毛霉产生蛋白酶和脂肪酶 15~18℃接种,酒精含量控制在12%左右 乳酸菌无氧呼吸产生乳酸 常温,无氧条件 pH检测,亚硝酸盐的检测方法 二、亚硝酸盐 亚硝酸盐(包括亚硝酸钾和亚硝酸钠)为白色粉末,易溶于水。 当人体摄入的亚硝酸盐总量达到0.3~0.5g时,会引起中毒,达3g时会引起死亡。 致癌因子 二、亚硝酸盐 测定亚硝酸盐含量的原理 在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸,N-1-萘基乙二胺反应生成紫红色物质。将经过反应显色后的待测样品与标准液比色,即可计算出样品中的亚硝酸盐含量。 测定亚硝酸盐含量的操作 1)配置溶液 对氨基苯磺酸溶液: 称取0.4克对氨基苯磺酸,溶解于100ml体积分数为20%的盐酸中,避光保存(4mg/ml)。 N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液: 称取0.2克N-1-萘基乙二胺盐酸盐,溶解于100ml的水中,避光保存(2mg/ml) 。 亚硝酸钠溶液: 称取0.10克于硅胶干燥器中干燥24小时的亚硝酸钠,用水溶解至500ml,再转移5 ml溶液至200 ml容量瓶,定容至200ml(5ug/ml) 2) 制备标准显色液 用移液管吸取0.20ml、0.40ml、0.60ml、0.80ml、1.00ml、1.50ml亚硝酸钠溶液,分别置于50ml比色管中,再取1支比色管作为空白对照。并分别加入2.0ml对氨基苯磺酸溶液,混匀,静置3~5分钟后,再分别加入1.0ml N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液,加蒸馏水至50ml,混匀,观察亚硝酸钠溶液颜色的梯度变化。 提取剂:分别称取50克氯化镉、氯化钡,溶解于1000ml蒸馏水中,用盐酸调节pH至1。 氢氧化铝乳液和2.5mol/l的氢氧化钠溶液。 作用:增大亚硝酸钠的溶解度 作用:作吸附剂,充分使滤液脱色 中和过多盐酸,营造碱性环境 亚硝酸钠 溶液 对氨基苯磺酸溶液 N-1-萘基乙二胺盐酸盐 3~5分钟 静置 2)配制标准显色液的基本步骤是 3)制备样品处理液的步骤是: ①称取 0.4 kg泡菜,粉碎榨汁,过滤得约200mL汁液。 ②取100mL汁液倒入500mL容量瓶,添加200mL 蒸馏水 和100mL 提取剂 ,摇床振荡1h,再加40mL 氢氧化钠溶液 ,最后用 蒸馏水 定容到500mL并立刻 过滤 获得滤液。 ③将滤液60mL移入100mL容量瓶,用 氢氧化铝乳液(吸附脱色)定容后过滤,获得 无色透明 的滤液。 取泡菜 榨汁 过滤 汁液 蒸馏水 加 氢氧化钠定容 氢氧化铝乳液定容 + (4)比色的步骤是: ①将40mL滤液移入50mL比色管中,并编号。 ②分别依次加入2.0mL的对氨基苯磺酸溶液 和1.0mL的 N-1-萘基乙二胺盐酸溶液 ,并定容到50mL,混匀静置15min。 ③观察颜色变化,并与 标准显色液 比较,记录亚硝酸盐含量。 ④计算样品滤液(40mL)中亚硝酸盐含量。 计算公式是: 样品中亚硝酸盐含量(mg) 取样量(40mL滤液的质量,Kg) (4)比色 吸取40ml透明澄清的滤液,转移到50ml比色管中,将比色管做好标记。按步骤2的方法分别加入对氨基苯磺酸溶液和N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液,并定容至50ml,混匀,静置15分钟后,观察样品颜色的变化,并与标准显色液比较,找出与标准液最相近的颜色,记录对应的亚硝酸钠含量,并计算。每隔2天测一次,将结果记录下来。 亚硝酸盐是一类常见的食品添加剂,能抑制肉毒杆菌的生长,色泽鲜嫩,为发色剂和防腐剂。 在细菌硝酸盐还原酶的作用下,硝酸盐被还原成亚硝酸盐。 亚硝酸盐本身并不致癌,但它与蛋白质代谢后产生的丰富胺类物质结合,形成的亚硝胺具有很强的致癌性。 硝酸盐可随水、腌肉、蔬菜、水果等进入人体。 多用抑制亚硝胺形成的食物,如大蒜、茶叶、富含维C的食物。 膳食中的绝大多数亚硝酸盐在人体内以“过客”的形式随尿排出,只有在特定的条件下(适宜的

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