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动物细胞培养 动物细胞的融合 核移植 单克隆抗体的制备 2.植物组织培养与动物细胞培养的比较 植物组织培养 动物细胞培养 原理 细胞的全能性 细胞增殖 培养基的物理性质 固体 液体(合成培养基) 培养基的成分 水、无机盐、维生素、蔗糖、氨基酸、琼脂等 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等 结果 新的植株或组织 新的细胞系或细胞株 应用 ①微型繁殖 ②作物脱毒 ③生产人工种子 ④单倍体育种 ⑤突变体的利用 ⑥细胞产物的工厂化生产 ①蛋白质生物制品的生产 ②皮肤移植材料的培育 ③检测有毒物质 ④生理、病理、药理学研究 条件 均需无毒环境无菌操作,适宜的营养、温度、pH、O2等 3.植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 细胞工程 植物体细胞杂交 动物细胞融合 实质内容 改变遗传物质、产生新的性状,获得细胞产品(使后代具有双亲的特性) 理论基础 植物细胞具有全能性 细胞增殖 诱导手段 物理法:离心、振动、电激 化学法:聚乙二醇 物理法:离心、振动、电激 化学法:聚乙二醇 生物法:灭活的病毒 诱导过程 去细胞壁 (纤维素酶、果胶酶) ↓ 原生质体融合 (获得杂种原生质体) ↓ 植物细胞培养 (获得植株) 获得分离的单个动物细胞 (胰蛋白酶处理) ↓ 诱导融合 ↓ 动物细胞培养 (细胞产品) 应用 白菜-甘蓝等杂种植物 单克隆抗体的制备(杂交瘤细胞) 受精作用、原生质体融合、动物细胞融合 受精作用 原生质体融合 动物细胞融合 不同点 细胞类型不同 精子与卵细胞 体细胞 体细胞 细胞来源不同 来自同种生物个体 一般来自不同种的生物个体 般来自不同种的生物个体 染色体数目变化不同 2N 2N+2N,不一定是2N×2 2N+2N,不一定是2N×2 融合条件不同 不需人工诱导 需人工诱导 需人工诱导 相同点 都有两个细胞融合成一个细胞,并且融合成这个细胞的遗传物质都是由原来的两个细胞决定的 【例2】 野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗 寒能力,但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究, 用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交,培育出了生活能力强 的杂交系马铃薯。据图分析回答问题: (1)①过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解,其中“酶解”所用的酶应 该包括________________。 (2)②过程可用聚乙二醇(PEG),其目的是______________________。 (3)请用文字和箭头表示出④⑤技术过程的实验流程:_____________________________________________________________。 由此过程可以看出植物细胞有形成完整个体的可能性,这是 __________________的表现。 (4)在培养基上培养一段时间后,原生质体会再生出细胞壁。可以取样, 通过__________________________实验来鉴别细胞壁是否已经再生。 (5)请说明运用植物体细胞杂交法的最大好处:_____________________________________________________________。 纤维素酶、果胶酶 诱导原生质体融合 融合细胞 愈伤组织 幼苗 植物细胞具有全能性 植物细胞的质壁分离与复原 可以克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍 【例3】 (潍坊质检)人CD20单克隆抗体是治疗一些恶性肿瘤的特效药 物,目前主要是通过培养哺乳动物细胞的方式生产。我国科学家已经 培育出世界上第一头转入了CD20抗体基因的转基因牛,可以从它产 的牛奶中直接提取CD20抗体。这项技术成熟后,有望使这一特效药 的生产成本降至现在的1/10。请回答: (1)单克隆抗体的制备过程需先将____________________和 ____________融合,这一过程的诱导方法与植物体细胞杂交不同的 是_________________。 (2)动物细胞培养需要在含__________________混合气体的培养箱中进 行,培养液中通常需加入________________等一些天然成分。 (3)转基因技术的核心是______________________。该过程用到的工 具酶有 ________________________和________________。 经过免疫的B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 用灭活的病毒诱导 95%空气加5%CO2 血清、血浆 基因表达载体的构建 限
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