12免疫复合物及检测.ppt

免疫复合物及检测 当Ag在体内持续存在或由微生物与宿主细胞不断释放入细胞外液时， 可引起特异性Ab产生，从而形成免疫复合物。 一.免疫复合物含义及形成： （一）含义：immune complex，IC 它主要指AgAb复合物及AgAbC 复合物两种。 （二）IC的形成： 1.Ag持续存在于体内：（产生Ab，形成AgAb或AgAbC） 感染：是Ag持续存在于体内的最常见原因，如细菌、病毒、寄生虫感染； 组织Ag：自身组织的部分成分发生变异， 如DNA、IgG等； 外源性Ag：在生活、工作环境中接触的外来性物质如粉尘、药物等； 肿瘤Ag：如白血病等 2.IC的清除受阻： 形成的IC一般分为大分子IC、中等大小的IC及小分子IC三种： 大分子IC：沉降系数为19S，MW100万，易被巨噬细胞吞噬而清除； 小分子IC：可溶性，沉降系数6.6S，MW 50万，易被肾小球滤过而排除； 中等大小的IC：沉降系数在8.8S－19S间，MW在50－100万间，既不易被巨噬细胞吞噬也不易被肾小球滤过，而沉积在血管壁、肾小球基底膜处，形成免疫复合物病。 二.免疫复合物病： （一）致病机理：中等大小的IC沉积在体内，通过激活补体、激活血小板 而致病。 激活补体： a.激活C3a、C5a、C567→趋化嗜中性粒细胞→释放溶酶体酶→引起组织损伤； b.激活C3a、C5a（过敏毒素）→作用于肥大细胞和嗜碱性粒细胞→释放血管活性物质→血管通透性增加→引起组织水肿； 激活血小板： 与血小板上的IgGFc受体结合→使血小板聚集→微血栓形成→局部出血缺血、坏死 常见病损部位 肾小球、关节、皮肤 （二）所致疾病 内脏毛细血管炎：如急性肾小球肾炎、变态反应性肺泡炎、溃疡性结肠炎 关节炎：风湿性关节炎、类风湿性关节炎； 皮肤：皮肤炎、脉管炎； 全身：SLE 血 清 病 类风湿性关节炎 系统性红斑狼疮 三.IC检测方法的分类： (一) 局部组织中IC的检测： 制备局部组织切片，用光学显微镜或电镜检测IC所致典型病理改变；或用IF、免疫酶技术检测IC在组织中的沉着。 （二）循环中IC的检测： Circle immune complex，简称CIC。 CIC检测方法大致分为两类： 1.抗原特异性方法：利用IC中Ag的特异性而设计的方法。但由于每一待测标本中Ag的特异性是不同的，不同Ag就需不同方法进行检测，造成方法不统一，因此临床上使用较少。 2.抗原非特异性方法：利用CIC与游离的Ag或Ab相比较，在物理性质、生物学活性上的差异而设计的方法。 根据物理性质上的差异而设计的方法： A.根据CIC与游离的Ag或Ab分子大小不同而设计的方法：凝胶过滤超滤法、蔗糖密度超速离心法； B.根据CIC与游离的Ag或Ab溶解度不同而设计的方法：聚乙二醇（PEG）沉淀试验 根据生物学性质的差异而设计的方法： A.根据C1q+CIC （AgAb)而设计的方法：抗补体试验、C1q结合试验； B.根据IgGFc受体＋CIC （AgAb)而设计的方法：血小板凝集试验； C.根据C3b受体＋CIC（AgAbC)而设计的方法：Raji细胞试验 四.IC检测方法概述： 1.聚乙二醇（PEG）沉淀试验： 原理：PEG为水溶性多聚体，在3％-4％低浓度时，能使血清中CIC沉降。 方法： PEG＋待测血清 ↓ 使PEG终浓度达到3－4％ ↓4℃过夜 离心，取出沉淀 ↓ 将沉淀用NaOH溶解 ↓ 在分光光度计上测定OD（A）值 优缺点： 该试验不但可检测IC，还可获得IC（收集沉淀），简单，快速； 特异性差，易受血清中大分子物质干扰； 常作为CIC检测的粗筛试验 2.抗补体试验： 原理：C1q+IC 方法：豚鼠血清（含补体)+待测血清(56°1h灭活其中补体） ↓ 再加入致敏羊红细胞 ↓ 不溶血 溶血 （IC阳性） （IC阴性） 优缺点： 该试验敏感，干扰因素多，易出现假阳性 凡引起补体失活的原因都可引起假阳