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有关概念: 原代培养:动物组织从机体取出后通过酶或机械方法分散成单个细胞后进行的初次培养。但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。 传代培养:当原代培养的细胞生长繁殖一定时间后由于空间不足活细胞密度过大导致营养枯竭,会影响细胞的生长,因此需要重新用胰蛋白酶等处理,进行分瓶扩大培养,称为传代培养。 有关概念 烧伤病人图片 治愈后图片 专题2.2动物细胞工程 资料一: 培养的动物细胞还可以用于检测有毒物质。许多致畸、致癌物质加入培养液后,培养细胞会发生染色体结构和数目的变异。根据变异细胞占全部培养细胞的百分数,可以判断某种物质的毒性。现在动物细胞培养已经成为检测有毒物质的快速而灵敏的有效手段。 资料二: 人工关节——软骨再生 1.第一次手术: 从病人关节软骨中未 受力的部分,取出一片约为葡萄干大小的健康软骨组织。 2.分离出软骨细胞并经三星期的体外 培养,使细胞数增加约10~20倍。 3.第二次手术: 清理软骨受损的部分,从下方骨头部位取出一片约与伤口大小相同的骨膜,缝在伤口上方,再将软骨细胞注射到骨膜下方。 资料三: 结果: 经过复健一年后即可恢复正常的生活。 一、动物细胞培养的应用 大规模培养生产生物制品(病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体) 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性 用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据 作为基因工程中的受体细胞 (一)、应用 思考题: 1、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料? 2、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞? 3、胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可说明细胞间的物质是什么成份?用胃蛋白酶行吗? 4、细胞膜的主要成份是什么?胰蛋白酶能将细胞消化掉吗?处理时间过长行吗? 5、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体? 6、动物细胞培养的条件 (四)过程 幼龄动物 取动物器官 和组织 剪碎组织 胰蛋白酶处理 单个细胞 细胞培养 请同学根据视频和图2-10来描述细胞培养的基本过程: 归纳 过程 取 的组织、器官 细胞悬浮液 酶 细胞贴壁、接触抑制 培养 10代细胞 培养 细胞株 无限传代 细胞系 单个细胞 加 液 遗传物质 改变 遗传物质 改变 动物胚胎或幼龄动物 胰蛋白 培养 原代 传代 未 已 细胞接触抑制 细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止,数量不再增加。 讨论 对于多细胞生物来说,细胞都生活在内环境中,根据你所学的知识,认为体外培养细胞应该需要什么样的条件? 细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到40~50代,这种传代细胞为细胞株。 细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别: 细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养。 多莉的诞生.swf (一)、动物细胞核移植的概念: 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体. 克隆动物:用核移植的方法得到的动物。 (二)、分类: 胚胎细胞核移植: 体细胞核移植: 细胞分化程度低,恢复 全能性容易 细胞分化程度高,恢复 全能性困难 去核卵母细胞 供体 细胞 电刺激使 两细胞融合 重组细胞 重组胚胎 新个体 代孕母牛C 胚胎移植 卵母细胞培养 思考:克隆牛的生殖方式是什么? 无性生殖 (三)、体细胞的核移植过程 高产奶牛A 供体细胞培养 供卵奶牛B (四)、体细胞核移植技术的应用前景 1、在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程 2、保护濒危物种 3、生产医用蛋白质 及组织器官的移植的供体 (五)、体细胞核移植技术存在的问题 1、克隆动物基因组重新编程的机制尚不清楚。 2、克隆技术效率低,畸形率高、死亡率高、易出 现早衰等问题。 3、生产克隆动物费用昂贵。 二 动物体细胞核移植 技术和克隆动物) 一动物细胞培养 概念 过程 原理 应用 概念 过程 应用 存在问题 体细胞核移植 胚胎细胞核移植 2、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 ( ) A.获得不死性的细胞 B.10代以内细胞 C.原代细胞
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