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实验五 线粒体和液泡系的超活染色与观察 一、实验目的 1 .观察动植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、发育和分布; 2 .了解细胞和细胞器的超活染色技术 二、实验原理 三、实验用品 1 .器材: 显微镜、恒温水浴锅、、剪刀、镊子、解剖刀、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、吸水纸 2 .试剂: Ringer液、1/5000詹纳斯绿B、1/3000中性红 3 .材料:人口腔上皮细胞、洋葱鳞茎内表皮细胞、绿豆幼根根尖 四、实验方法 (一)线粒体的超活染色与观察 1 .口腔上皮细胞线粒体的超活染色 1/5000詹纳斯绿B 2滴,口腔上皮细胞(牙签刮取),载玻片于37℃恒温水浴染色10-15min,盖上盖玻片,用吸水纸吸去多余的水分,显微镜下观察. 2 .洋葱鳞茎内表皮细胞线粒体的超活染色与观察 1/5000詹纳斯绿B溶液1-2滴于载玻片上,撕取一片洋葱鳞茎内表皮,载玻片于37℃恒温水浴染色10-15min,用吸管吸去软液,加上 Ringer液,盖上盖玻片,显微镜下观察. (二) 绿豆幼根根尖液泡系的中性红染色观察 初生绿豆幼苗根尖(1-2cm)纵切面切片,1/3000中性红溶液1滴染色5-10min,载玻片于37℃恒温水浴,吸去软液,加上 Ringer液,盖上盖玻片用镊子轻压盖片,使根尖压扁,显微镜下观察. 五、作业 1 .绘出人口腔上皮细胞示线粒体的形态与分布并简要分析。 2 .绘出绿豆幼根根尖组织液泡系的形态与分布并简要分析 。 * 詹纳斯绿B可专一性地对对线粒体进行活染,这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用,使染料始终保持氧化状态(即有色状态),呈蓝绿色。 中性红对液泡系的染色具有专一性,将活细胞中的液泡系染成红色。 洋葱鳞茎表皮细胞线粒体 * * *
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