细菌的接种和注意事项终极版.ppt

细菌的接种及注意事项 灭菌接种环 1.要充分灭菌接种环，以免污染其标本 。 2.要适当冷却再取标本，以免带不出标本中的菌种。 取标本 1.蘸取标本时应适量，以免标本太少漏检。 2.液体标本，如尿液，应注意混匀。 接种 CO2在细菌培养中的意义 1有些细菌在初次分离培养时，需要5﹪-10﹪的CO2。因为细菌在生长过程中能够分解培养基中的某些含氮物质产生氮，对该菌有杀灭作用，而CO2能中和细菌产生的氮，以减少对细菌的毒性。如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、牛布鲁菌等。 2.为细菌提供碳源，促进细菌的生长。如肺炎链球菌，草绿色链球菌。 常见细菌的鉴别及其特点 阳性球菌 葡萄球菌---金黄色葡萄球菌 金葡特点 葡萄球菌---表面葡萄球菌 表葡特点 链球菌 肺炎链球菌 Opt实验 杆菌肽实验 葡萄球菌与链球菌的鉴别： 1.涂片—涂片革兰染色，葡萄球菌呈葡萄串样，链球菌呈链状。 2．M-H试验—当染片不能区别时，接种到M-H平板，长成菌落之后，可挑单个菌落做触酶试验，+是葡萄球菌，－是链球菌。 肠球菌 阴性杆菌 大肠杆菌：G-杆菌，有鞭毛、菌毛，无芽胞。菌落2~3mm,圆形凸起，灰白湿润，光滑半透明，边缘整齐。某些菌落可产生有透明溶血环。 鲍曼不动杆菌 变形杆菌 嗜麦芽假单胞菌 流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌 菌落特点： 圆形、凸起光滑、边缘整齐不透明、灰白色 有粘性的菌落 多数菌落不溶血 在中国兰上为粉红色菌落 菌落特点： 较大菌落、凸起、灰白色黏液型、 相邻菌落容易发生融合 可挑出长丝状细丝 肺炎克雷伯杆菌 迁徙生长 菌落特点： G-，两边钝圆，有明显的多形性，呈球形或丝状，无芽胞无荚膜，有鞭毛，运动活泼。普通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌株呈迁徙扩散生长，迅速弥漫。波纹状薄膜布满整个培养基表面。 菌落特点： G-杆菌，细长略弯曲。不透明，灰黄色菌落，在血平板上可产生氨味。本菌氧化酶阴性，与大多数假单胞菌不同。 * * * * * * 1.细菌的接种方法有很多，如平板划线法、斜面接种法、穿刺接种法，等等。但我们用的最多的是： ★平板划线法—意义 指把混杂在一起的微生物，用接种环在平板培养基表面，通过分区划线，稀释得到较多的独立分布的单个菌落，即将样本在固体培养基表面多次做由点到线稀释而达到分纯的目的。 ★ 一区：所占区域大约是平板面积的1/5~1/4 二区：由一区向二区带出三四条平行线 三区：由二区引出三四次，但 三区面积最大 在细菌室的培养箱上有一个CO2的开关，为什么要用CO2呢？ 是人类化脓性感染最常见的病原菌， 可以引起局部感染，也可以引起全身感染。 血浆凝固酶，阳性。 血平板上呈黄色菌落，大而凸起，表 面光滑，有β溶血环。 G+阳性球菌，葡萄状排列，无芽孢，无荚膜。 1. 2. 3. 4. 正常存在于人体皮肤、黏膜表面，多见于院内感染，如体内异物留置，静脉导管等 血浆凝固酶，阴性 表葡形态同金葡相似，但是为白色、扁平菌落，无溶血环 1. 2. 3. 3. 常见的链球菌主要有化脓性链球菌、草绿色链球菌、肺炎链球菌 。 根据抗原结构不同可以把链球菌分为A、B、C、D等二十个群，但对人类有致病性的大多数属于A群，少量属于B群。 根据在血平板上溶血分为以下三种： 甲型（α型）溶血性链球菌，又称草绿色链球菌，菌落周围有草绿色溶血环，致病力弱，是条件致病菌。 乙型（β型）溶血性链球菌，产生强烈的溶血毒素，在血平板上可使菌落周围出现2～4mm的无色透明溶血环。 丙型（r-）链球菌，菌落周围无溶血环，又叫不溶血性链球菌，通常不致病。 菌落特点：在血平板上0.5～1.5mm,灰白色半透明，表面光滑，扁平，周围环绕草绿色溶血环，培养放置24h以上的菌落，还会因为产生自溶酶的作用，而致菌落中央塌陷而边缘隆起，呈脐窝状。 肺炎链球菌、Ａ群、Ｂ群的区分： 　　　　　 Ｏpt试验 抑菌环14, 鉴定为肺链 ＋ 杆菌肽试验 － ＋ － Ａ群 CAMP试验 ＋ B群 11 肠球菌属特点：Ｇ+，成圆球形或椭圆形，单个，成对，或短链，均可。 在血平板上可形成灰白色不透明表面光滑，0.5~1.0mm大小的菌落，可有溶血现象。 以粪肠球菌和屎肠球菌为常见： 阿拉伯糖 山梨醇 屎肠球菌 阳性 阴性 粪肠球菌 阴性 阳性 *