CA7000血凝仪分析程序.doc

CA-7000血凝仪分析程序 1 原理 CA7000 是一台用于体外诊断的全自动凝血分析仪。能快速并且高精度地分析大量样本。其利用凝固法、发色底物法及免疫分析样本。 1.1凝固法 基本测试原理是光学法的散射光检测（用660nm光电二极管检测散射光强度的变化）。还并用了百分比方式的测定原理，当加入试剂后，凝血启动，随之光学出现变化，仪器把这种光学的变化描绘成凝固曲线：把开始出现凝集的起始点作为0%、把完全凝固的终点作为100%、把50%变化点处作为凝固时间（报告点），当测定含有干扰物（黄疸、溶血、高脂血症等）或低纤维蛋白原血症的特殊标本时，其作为起始点的0%的基线会随之上移或下移，相当于扣除本底干扰。用此法检测的项目PT、APTT、FIB、TT、内源凝血因子（FVIII、IX、XI、XII）、外源凝血因子（FII、V、VII、X）等。 1.2 发色底物法 试剂中为人工合成的含某种酶裂解位点的短肽，与产色物质如对硝基苯胺（pNA）连接，待检物品中含有活性酶或无活性的酶源被加入的激活剂活化，在检测过程中产色物质被解离下来，使被检物品出现颜色变化，与其被检物含量呈一定的数量关系。用此法检测项目：AT-III、PIg、PC、PS、FM、PAI、Tpa、α2-AP等。 1.3免疫法 以被检物作为抗原，制备相应的多克隆抗体，利用抗原抗体的特异结合反应来对被检测物进行定性和定量检测，在凝血仪上多采用免疫比浊法测定，其基本原理是当一定波长的光线通过反应混合液时，被其中抗原抗体反应形成的免疫复合物吸收而减弱，在一定范围内，其吸光度与复合物量呈正相关，因此当抗体量固定时，根据复合物的吸光度值，即可推算出待测抗原含量。用此法检测的项目有D-二聚体、vWF-因子、FDP等。 2 试剂及消耗品 2.1凝血活酶含钙试剂（Thrombore1 S) 2.1.1德灵（DADE BEHRING）公司生产，ISI（国际敏感度指数）≈0.96. 2.1.2使用方法：配制时每瓶用10ml蒸馏水溶解，须放置37℃水浴30min方可使用，使用前小心混匀。 2.1.3试剂稳定性：未溶解试剂2-8℃至包装有效期内稳定；试剂溶解后37℃稳定8h、15-25℃稳定2d、2-8℃稳定5d。 2.2激活剂 2.2.1德灵（DADE BEHRING）公司生产，为液体试剂，直接使用，使用前轻轻颠倒混匀5-8次。 2.2.2储存：未开盖试剂置2-8℃存放至有效期，开盖后2-15℃有效期7d，不能冷冻保存。 2.3氯化钙溶液（Calcium Chloride Solution） 2.3.1德灵（DADE BEHRING)公司产品，为液体时机，直接使用。 2.3.2储存：未开盖试剂置2-25℃存放至包装有效期，开盖后2-25℃有效期8周。 2.4凝血酶试剂 2.4.1德灵（DADE BEHRING)公司产品。 2.4.2配制方法：每瓶5ml专用缓冲液溶解，须放置室温或37℃30min后方可使用。 2.4.3储存：未溶解试剂2-8℃至包装有效期，试剂溶解后2-8℃可稳定7d，机上有效期（15℃）10h。 2.5D-Dimer Plus试剂盒 2.5.1为德灵（DADE BEHRING)为公司产品，包含以下内容：D-Dimer PLUS试剂，6小瓶，每瓶4ml；D-Dimer PLUS乳胶，6小瓶，每瓶5ml；D-Dimer PLUS溶剂，1小瓶，每瓶25ml。 2.5.2配制方法 2.5.2.1D-Dimer PLUS Reagent：每瓶用4ml“D-Dimer PLUS Reconstitution Medium”溶剂溶解，在室温下（15-25）℃放置约5min，并不时进行摇动混匀。 2.5.2.2D-Dimer PLUS Accelerator：用5ml“蒸馏水”溶解，在室温下（15-25℃）放置约15mn，并不时进行摇动混匀。 2.5.3储存：没开配试剂置2-8℃存放至包装有效期，溶解后按表8-1-1条件保存。 保存条件 D-Dimer乳胶试剂（使用前摇匀） D-Dimer Accelerator 2-8℃（冷藏） 不建议 5h 15-25℃（不开盖） 5d N/A ≦-18℃（冷冻） 2周 2周 上机稳定性（8-20℃） 48h N/A 表8-1-1 D-二聚体试剂配制后保存条件 2.5.4注意事项 2.5.4.1D-D乳胶试剂在0-4℃易发生自凝现象，自凝现象会引致试剂浊度发生变化而影响监测，建议复溶后常规使用的乳胶试剂保存在15-25℃，可以避免乳胶试剂的自凝现象，但开盖状态下乳胶试剂上机的稳定性为仅48h。 2.5.4.2溶解后的试剂若在2d内用不完的，请分装冷冻保存，但注意不能反复冻溶。 2.6缓冲液（Dade? Owren’S Veronal Buffer或CA