如何避免细胞培养物的污染.PDF

Application 如何避免细胞培养物的污染 污染是细胞培养的大敌，培养的细胞受污染后，会发生状态改变 ，如生长变慢、发生病理性改 变，甚至死亡，造成实验失败和细胞株（系）丢失。 细胞培养过程中污染的来源主要有以下几种途径： 1、动物组织样本不洁净。如在做原代细胞培养时，组织本身有细菌或取材时与有菌的组织接 触，会使取到的细胞带菌，造成污染。要选择无菌的样品，操作时也应将洁净区和污染区区分开。 2、使用器材、试剂消毒不彻底。培养细胞时使用的器材、培养基、血清等灭菌不彻底，也会 造成污染。因此，使用的各种物品都应进行彻底的灭菌。 3、操作不规范。细胞接种或传代过程中操作不规范，没有在无菌环境中操作、操作过程中未 将培养瓶口用酒精擦拭或灼烧、动作不正确使移液管碰到污染物品、大声说话等，都有可能造成污 染。因此，操作过程必须规范，操作前要洗手、消毒、穿实验服 ，操作台面要用酒精擦拭消毒。操 作过程中动作要轻、尽量不谈话，试剂瓶口要用酒精擦拭或烧灼消毒，移液管要经常更换，一旦与 其他污染品发生碰触应丢弃。实验完毕要及时清理操作台和实验室。 4、培养环境有污染。空气中含有大量微生物，如果培养箱与外界隔离不严，或消毒不充分、 过滤器超出使用寿命，都有可能会造成污染。因此，培养过程中，取放细胞要及时关门。多种细胞 同时培养时，要严格区分避免发生交叉污染。保持培养箱洁净，取放物品时要小心防止液体倾洒， 培养箱长期不用再次使用前需要清洁灭菌，选择有HEPA 过滤器的培养箱，并在过滤器达到寿命后 进行更换。 NuAire 的5800 系列和新推出的5700 系列、8600 系列培养箱， 有以下特点，可为细胞培养提供洁净、安全的培养环境： 1、采用闭循环HEPA 过滤系统。气泵将腔内气体抽出后经过大的 在线胶囊 HEPA 滤器返回腔内，供应气体也经过 HEPA 过滤器过滤之后 才进入培养室内，保证气体环境洁净。这种循环保证培养箱内每20 到 30 分钟换气一次，避免样品干燥。另外，培养室内持续维持相对正压的 环境，避免开箱门时污染物进入。培养环境达到ISO 5 级。HEPA 过滤 器不在培养室内，不占用有效培养空间，且可避免过滤器在培养室内潜 在的污染样品的可能性。给培养箱灭菌时HEPA 过滤器不需要取出，灭 完菌后也不需要放回，避免二次污染。 2、气套式5800 系列和5700 系列具有95℃湿热和145℃干热两种灭 菌程序，用户可根据需要进行选择，确保培养箱内部灭菌彻底。触控屏 上可显示提示信息，一步步指导用户进行消毒程序。箱内组件如搁板， 在灭菌过程中不需要取出。 3、培养室采用 16gauge, 304L 抛光不锈钢材质，表面光滑， 圆角设计，无接缝，方便清洁。搁板、支架和滑轨方便拆卸，可 进行高压灭菌，或在运行消毒程序时放在培养室内灭菌。 4、CuVerro 抑菌铜内胆和搁板可杀死细菌，最大限度消除污染。CuVerro®经独立实验室检测， 并在EPA 注册登记。CuVerro®抑菌铜表面可在2 小时内杀灭99.9%以上的细菌，如定期清洁，在 重复污染后也可持续杀灭99%的细菌。 结合闭环HEPA 过滤系统、双重灭菌程序、大圆角抛光不锈钢内胆、CuVerro®抑菌铜内胆和 搁板，NuAire 培养箱可为用户提供最为洁净安全的细胞培养环境 ，使细胞培养更加放心。