综合性实验-食品毒理学与安全性评价.ppt

三、食品安全性毒理学评价试验的结果判定 1.急性毒性试验 当LD50小于人的可能摄入量的10倍时，应放弃将该受试物用于食品，不再继续其他的毒理学试验；如大于10倍，可进入下一阶段的毒理学试验。当LD50为人的可能摄入量的10倍左右时，应进行重复试验，或用另一种方法进行验证。 外源化学物急性毒性分级（WHO） 毒性分级 大鼠一次经口LD50 (mg/kg) 6只大鼠吸入4小时，死亡2~4只的浓度(ppm) 兔经皮LD50(/mg/kg) 对人可能致死的估计量 g/kg 总量(g/60kg) 剧毒 1 10 5 0.05 0.1 高毒 1~ 10~ 5~ 0.05~ 3 中等毒 50~ 100~ 44~ 0.5~ 30 低毒 500~ 1000~ 350~ 5~ 250 实际无毒 5000~ 10000~ 2180~ 15 1000 我国食品毒理急性毒性分级法(1994) 急性毒性分级 大鼠经口LD50(mg/kg) 大致相当于70kg人的致死量 6级(极毒) 1 稍尝,7滴 5级(剧毒) 1~50 7滴~1茶匙 4级(中等毒) 51~500 1茶匙~35克 3级(低毒) 501~5000 35~350克 2级(实际无毒) 5001~15000 350~1050克 1级(无毒) 15000 1050克 我国卫生部在《食品安全性毒理学评价程序》(2003)中对遗传毒理学试验的要求是： 考虑原核细胞与真核细胞、体外和体内试验以及体细胞和生殖细胞的原则。从①Ames试验或V79/HGPRT基因突变试验、②骨髓细胞微核试验或哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验、③TK基因突变试验、小鼠精子畸形分析或睾丸染色体畸变分析选一项。 其他备选遗传毒性试验：显性致死试验、果蝇伴性隐性致死试验、非程序性DNA合成试验。 2.遗传毒性试验 1. 如三项试验中，体内、体外各有一项或以上试验阳性，则表示该受试物很可能具有遗传毒性和致癌作用，放弃。 2. 如三项试验中一项体内试验阳性或两项体外试验阳性，则再选两项备选试验（至少一项体内试验）。如再选的试验均为阴性，则可继续将进行下一步的毒性试验；如其中有一项试验阳性，则结合其它试验结果，经专家讨论决定，再做其它备选试验或进入下一步的毒性试验。 3.如三项试验均为阴性，则可继续进行下一步的毒性试验。 3.短期喂养试验 在只要求进行两阶段毒性试验时，若短期喂养试验未发现明显毒性作用，综合其他的试验即可做出初步的评价。若试验中发现有明显毒性作用，尤其是具有明显的剂量-反应关系时，应考虑开展进一步的毒性试验。 4.90d喂养试验、繁殖试验、传统致畸试验 根据这三项试验中最敏感指标得出的最大未观察到有害作用剂量（NOAEL）进行评价，判别标准是： （1）当NOAEL≤人的可能摄入量的100倍，表示毒性较强，应放弃将该受试物用于食品。 （2）100倍＜NOAEL＜300倍，应进行慢性毒性试验 （3）NOAEL≥300倍时，可考虑允许应用于食品。 5.慢性毒性（包括致癌）试验 根据慢性毒性试验所得的最大未观察到有害作用剂量进行评价： （1）NOAEL≤人的可能摄入量的50倍，表示毒性较强，应放弃将该受试物应用于食品。 （2）50倍＜NOAEL＜100倍时，经过安全性评价后，方可决定该受试物可否用于食品。 （3）NOAEL≥100倍时，可考虑允许应用于食品。 根据致癌试验所得的肿瘤发生率、潜伏期和多发性等进行致癌试验结果判定的原则是：凡符合下列情况之一，并经统计学处理有显著性差异者，可认为致癌试验结果未阳性。若存在剂量-反应关系，则判断阳性更可靠。 (1) 对于对照组也出现的一种或数种肿瘤，试验组肿瘤发生率增加； (2) 试验组发生对照组没有的肿瘤类型； (3) 试验组肿瘤发生早于对照组； (4) 与对照组比较，试验组每个动物的平均肿瘤数增加。 6.新资源食品、复合配方的饮料等 如果试样的最大加入量（一般不超过饲料的5%）或液体试样最大可能的浓缩物加入量仍不能达到最大无作用剂量为人的可能摄入量的规定倍数时，可考虑综合其他的毒性试验结果和实际食用或饮用量进行安全评价。 食品安全性评价试验设计 试验背景与意义 受试物选择 试验动物选择与受试物剂量设计 详细的试验步骤 预期结果 注意事项 每人提交一份试验设计方案 每组制作一份演示文稿 参考资料 食品安全国家标准 GB15193.1~ GB15193.25 《食品毒理学》刘宁，沈明浩，中国轻工业出版社 《毒理学基础》王心如，人民卫生出版社 食品毒理学 与 安全性评价 第一节 毒理学安全性评价概述 一、基本概念 毒理学安全性评价是通过动物实验和对人群的观察，阐明食品中的某种物质（含食品固有物质