牛胎儿成纤维细胞磷酸化蛋白质组定性分析.PDF

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　２０１６（０４上）：１９－２２，２８２ 牛胎儿成纤维细胞磷酸化蛋白质组定性分析 农　微，谢体三，卢安根，莫建光，郭亚芬，蒋和生，蒋钦杨 （广西大学 动物科学技术学院，南宁５３０００５） 中图分类号：Ｓ８２３．１；Ｑ５１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００４－７０３４（２０１６）０４－００１９－０５ 关键词：成纤维细胞；体细胞重编程；诱导性多能干细胞；牛；磷酸化蛋白 摘　要：为了研究蛋白质磷酸化修饰状况在体细胞被诱导为多能性干细胞过程中发挥的作用，试验采 用ＴｉＯ 富集磷酸化肽段技术和高通量质谱技术，对第三代牛胎儿成纤维细胞的磷酸化修饰蛋白质组 ２ 进行定性检测和生物信息学分析。结果表明：在牛胎儿成纤维细胞样品中共鉴定出３６３种磷酸化蛋 白，共５０２个磷酸化位点。这些磷酸化蛋白参与多种细胞信号传导通路，在代谢进程和细胞定位等生 物学进程中发挥重要作用。说明对牛胎儿成纤维细胞磷酸化修饰蛋白质组的定性研究可为进一步探 讨牛体细胞重编程为诱导性多能干细胞的机理和提高重编程效率奠定理论基础。 Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｐｈｏｓｐｈｏｐｒｏｔｅｏｍｅｏｆｂｏｖｉｎｅｆｅｔａｌｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ ＮＯＮＧＷｅｉ，ＸＩＥＴｉｓａｎ，ＬＵＡｎｇｅｎ，ＭＯＪｉａｎｇｕａｎｇ，ＧＵＯＹａｆｅｎ，ＪＩＡＮＧＨｅｓｈｅｎｇ，ＪＩＡＮＧＱｉｎｙａｎｇ （ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＧｕａｎｇｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ５３０００５，Ｃｈｉｎａ） Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ；ｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｌｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ；ｉｎｄｕｃｅｄｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌ；ｃａｔｔｌｅ；ｐｈｏｓｐｈｏｐｒｏｔｅｉｎ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｒｏｌｅｏｆｔｈｅｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓｔａｔｕｓｏｆｐｒｏｔｅｉｎｐｈｏｓｐｈｏｓｒｙｌａｔｉｏｎｓｔａｔｕｓｉｎｔｈｅｐｒｏｃｅｓｓｏｆｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｌｓｉｎｄｕｃｅｄｔｏｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ，ａｔｅｃｈｎｉｑｕｅｆｏｒＴｉＯ ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔｏｆｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅｄｐｅｐｔｉｄｅｓａｎｄｈｉｇｈ－ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙｔｅｃｈｎｉｑｕｅｗｅｒｅｕｓｅｄｆｏｒｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ ２ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎａｎｄｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｐｈｏｓｐｈｏｐｒｏｔｅｏｍｅｆｒｏｍｔｈｅｔｈｉｒｄ－ｐａｓｓａｇｅｂｏｖｉｎｅｆｅｔａｌｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ（ＢＦＦｓ）．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ ａｔｏｔａｌｏｆ３６３ｐｈｏｓｐｈｏｐｒｏｔｅｉｎｓｗｉｔｈ５０２ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｓｉｔｅｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｉｎｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｏｆＢＦＦｓ．Ｔｈｅｓｅｐｈｏｓｐｈｏｐｒｏｔｅｉｎｓｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｄｉｎｍｕｌ ｔｉｐｌｅ－ｃｅｌｌｓｉｇｎａｌｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｐａｔｈｗａｙｓ，ａｎｄｐｌａｙｅｄａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｍｅｔａｂｏｌｉｃｐｒｏｃｅｓｓｅｓ，ｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ，ａｎｄｏｔｈｅｒｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｔｈａｔｔｈｅｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｔｈｅｐｈｏｓｐｈｏｐｒｏｔｅｏｍｅｏｆＢＦＦｓｍａｙｌａｙａｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｆｏｒｆｕｒｔｈｅｒｅｘｐｌｏ ｒｉｎｇｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｌｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇｔｏｔｈｅｉｎｄｕｃｅｄｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓａｎｄｉｍｐｒｏｖｉｎｇｔｈｅｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｏｆｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ． 　　通过导入特异性转录因子组合，研究人员成功地 率。为了系统地揭示ｉＰＳＣｓ和ｉＰＳＣｓ来源的体细胞的 将小鼠和人的体细胞重编程为诱导性多潜能干细胞 差异，研究人员