粉防己碱促进增生性癫痕成纤维细胞凋亡的实验研究.PDF

杭州师范学院学报(自然科学版) Vo l. 4 No.6 第 4 卷第 6 期 2005 年 11 月 Journal 01 Hangzhou Teachers College ( Natural Science Edition) Nov. 2005 文章编号: 1004 - 9403 ( 2005 ) 06 - 0426 一 02 粉防己碱促进增生性癫痕成纤维细胞凋亡的实验研究 钟晓春 (杭州师范学院临床医学院，浙江杭州 310036) 摘 要:自的 观察粉防己碱对培养的人增t性搬痕成纤维细胞调亡的影响。方法 取材白人体增生除癫痕，提 取出成纤维细胞进行地养，设实验组和对!1在组，实验细加入粉防L.碱，用 Tunnel 法检测细胞的凋亡，比较两组间的 细胞凋亡率。结果 使用粉防己碱后，成纤维细胞的凋亡率显著增加，与对照组比较，差异有非常显著意义(P 0.01) 。结论 通过促进癫痕组织成纤维细胞的凋亡，粉防己碱可能具有防治搬痕的作用，值得进一步探讨。 关键词:粉防己碱;癫痕;凋亡 中图分类号:R329.2 文件标识码:A 次。当瓶壁基本长满了原代培养细胞时，用 0.25% 粉防己碱是中药粉防己碱根中的主要成分，属 双辛基异哇琳类生物碱，为钙离子阻滞剂[IJ 。有学 膜蛋白酶消化，进行传代培养。本实验所用为第 3 者认为，粉防己碱可以抑制体外培养的癫痕成纤维 代细胞O 细胞的生长，也就可以抑制癫痕成纤维细胞的增殖， 1. 3 实验方法 选生长良好的传代细胞，用 因而对增生性耀痕可能具有一定的防治作用r 2 J 。 0.259毛的膜蛋白酶消化，制成细胞悬液，将被度调圭 9 本实验培养来自增生性癫痕的成纤维细胞，加入粉 2xl0 /L ，接种于培养Jill中，置于培养箱中培养 24 防己碱后，观察其对成纤维细胞凋亡的影响，进一步 h 。之后，对照组仅加培养液，实验组加入含有 80 探时用其防治癫痕的可能性O μg/ml 粉防己碱的培养液，再培养 24 h 后，计算细 7 胞数，将浓度调为 5 X 10 /ml。 1 材料与方法 Tunnel 法检测细胞的凋亡:实验组、对照组各 4 1. 1 仪器和试剂 倒置显微镜( Olympus ，日本) , 张载玻片，在每张载玻片上滴加 50 - 100μl 实验组 病理图像分析仪(北京麦克奥迪图象技术有限公 或对照组细胞悬液并使之干燥，室温下在 4% 的多 司) ;粉防己碱粉剂购于浙江金华制药厂，DMEM 培 聚甲醒液中浸泡 15 min 以固定载玻片上的细胞。 养基及胎牛血清购于美国 Gi