水危害实验.doc

水危害实验 篇一：实验一)TID污染物的地表水体污染危害实验 （实验一）TID污染物的地表水体污染危害实验 在某种水环境条件下，利用水生生物受水体污染物的胁迫而产生的各种机体反应来测试水体污染程度，称为水质的生物检测生物测试的结果可直接反映复杂体系中所有组分的综合作用，包括各组分之间可能存在的叠加拮抗或协同作用等因此，它可以弥补理化检测方法的不足，选择合适的生物测试方法或生物与化学分析方法结合使用，能够有效地预测复杂体系对生态系统的毒理效应。 传统的毒性试验包括微生物毒性试验，藻类毒性试验大型蚤急慢性毒性试验，鱼类急慢性毒性试验。 发光细菌毒性实验在微生物毒性实验中研究领域是最为广泛的# 在正常条件下发光细菌能发出一定波长的光!其发光强度可以受到许多有毒物质的抑制!通过对其发光强度变化的测定可以实现水质的急性毒性检测!故受到众多研究者的关注，可对多种有毒有害物质共存时产生的综合毒性进行评价，具有实时检测，前处理简单，成本低廉等优点。 起始发光强度在（2.0-4.0）×105与污染物素的最佳作用时间为30min. （一 ）实验目的 1.掌握发光细菌测毒性的标准方法； 2.根据发光强度测TID毒性； 实验原理 发光细菌由于其独特的生理特性，在环境监测中被作为测定环境中毒物的指标。生物发光是某些生物的一种生理现象。对环境敏感的发光细菌，用于检测水体生物毒性，现已成为一种简单、快速的生物毒性检测手段。发光细菌在正常的生理条件下能发出波长在450～490nm 的蓝绿色可见光，在一定的试验条件下发光强度是恒定的。其遇到毒性物质时发光强度有所改变，同时与该物质浓度与的毒性大小有关。毒性用EC50 来表示，即发光强度降到50%时候的浓度。浓度与发光强度呈负线性关系，因而可以用发光强度来表示毒性大学。 （二）实验材料与方法 1.试剂 TID溶液，氯化钠，蒸馏水 氯化钠溶液：称取3.0mgNacl溶于100水中至于2-5oC冰箱备用；TID0.02mg/m L在50mL容量瓶中用3.0mg/m Ll氯化钠稀释至刻度。 参比毒物TID溶液0.02，0.04，0.08，0.10，0.12，0.16，0.18，0.20，0.22，0.24mg/L母液TID p=2000mg/L 用移液管吸10mLTID入1000ml容量瓶中3.0mgNacl定容，再用移液管吸去20mg/L的母液250ml容量瓶中用3.0mgNacl定容，将此溶液导入试液瓶中，用3.0mgNacl溶液配成一系列浓度的溶液。 2.仪器 生物发光光度计，微量注射器，5mL测试管，微量注射器，10uL，注射器1mL, 定量加夜瓶5mL；吸管2，10，25；试剂瓶100mL；量筒100，500mL；棕色量瓶50，250，1000mL； 3 样品 3.1 样品液预试验 取事先加氯化钠至3g/m L浓度的样品母液2mL装入样品管，测相对发光度。如果相对发光度小于50%乃至于零，欲以EC50表达结果，则需稀释。溶液稀释一律按3g/100ml氯化钠定容。 （三）测定 3.1测定条件 室温20-25℃同一批样品在测定过程中要求温度波动不超过±1℃。且所有测试器皿及试剂，溶液侧前1h 均置于控温的测试室内。 3.2 PH 若须测定包括PH影响在内的急性毒性，不应调节水样PH。 若须测定排除PH影响在内的急性毒性，须将水样和CK（氯化钠3g/100ml）PH测前调节至下值。 本法只剩测定包括溶解氧影响在内的急性毒性。 3.4测定步骤 1试管的排列 于塑料或铁制试管架上按以下二中情况排列测试管。 样品母液相对发光度为1%以上者，如下排： 2.左侧放参比系列浓度溶液管，右侧放样品管，前排放氯化汞溶液和样品管，后一排放对照（CK）管， 后二排放CK预试验管。每管氯化汞或样品液均配一管CK（氯化钠3g/100ml蒸馏水溶液），设3次重复，每测一批样品，均须同时配置测定系列浓度TID标准溶液。 样品母液相对发光度为50%以者下乃至零这，如下排： 左侧仅放TID0.10mg/L溶液，右侧放样品稀释液管（从低浓度到高浓度依次排序），1每测一批样品，须同时配置TID0.10mg/L溶液。 加3g/L氯化钠溶液 用5ml的定量加液瓶给每支CK管加2或5ml 氯化钠3g/100ml(据仪器型号而定)。 3. 加样品液 用2ml或5ml吸管给每支样品管加2ml或5ml样品液。每个样品号换一支吸管。 4.发光细菌冻干菌剂复苏 从冰箱2-5℃室取出含有0.5g发光细菌冻干粉的氯化钠溶液，投入置于冰块的小号（1-5）5L保温瓶，用1ml注射器吸收0.5ml冷的氯化钠2g/100ml（适用于5ml测试管）或1ml冷的氯化钠2.5%（适用于2ml测试管）注入