8果蝇唾腺染色体幻灯片.pptVIP

果蝇唾腺染色体 一 实验原理 双翅类昆虫（摇蚊、果蝇等）幼虫期的唾腺细胞很大，其中的染色体称为唾腺染色体(salivary chromosome)。 唾腺染色体的特征： 1. 唾腺细胞发育成熟后停滞于永久性有丝分裂前期。 2. 体细胞同源染色体配对，所以染色体只有半数（n）。各染色体的异染色质多的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心（chromocenter.） 3. 唾腺染色体经过多次复制而并不分开，大约有1000～4000根染色体丝的拷贝，所以又称多线染色体（polytene chromosome）。 4. 这种染色体较普通染色体大得多，宽约5μm，长约400μm，相当于普通染色体的100～150倍，又称为巨大染色体。 5. 多线染色体经染色后，出现深浅、密疏不同的横纹，这些横纹的数目和位置往往是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征。如染色体有缺失、重复、倒位、易位等，在其上很容易被识别出来。 二 实验目的 练习取出果蝇等幼虫唾腺的技术和制作唾腺染色体标本的方法。 观察多线染色体的特征： a. 体细胞配对，所以染色体只有半数（n）；各染色体的异染色质多的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心(chromocenter）; b.多线性和巨大性； c. 横纹有深浅、疏密的不同，可作为染色体的识别标志。 把观察到的好图像画下来。 三 实验材料 黑腹果蝇的三龄幼虫。这种材料易饲养又易取得唾腺，但为了得到更好的染色体标本，需要在20～25 ℃和营养良好的条件下饲养幼虫。选择行动迟缓肥大，爬上管壁的三龄幼虫（就要化蛹了）做标本最佳。 四 实验器具和药品 用具：双筒解剖镜，显微镜，镊子，解剖针，载玻片，盖玻片，吸水纸。 药品：改良苯酚品红，生理盐水。 五 实验步骤 1.把载玻片置于解剖镜下。载玻片上滴一滴生理盐水，取三龄幼虫放在其上，操作者两手各握一只解剖针，一只解剖针压住幼虫后段1/3～1/2 处，固定幼虫。一只解剖针按住幼虫头部口器，用力向前拉，把头部从身体拉开，唾腺随之而出，唾腺是一对透明的棒状腺体。 2.在载玻片上除去幼虫其他组织部分，把唾腺周围的白色脂肪剥离干净，再把唾腺移到干净的载玻片上。 3.染色10分钟后，盖上干净的盖玻片，用滤纸先轻轻压一下，吸去多余的染液。然后放在平的桌子上，用大拇指用力压片。用力方向可因人而异，多做几次，可得较好的片子。 4.制成的片子在显微镜下观察。 5. 如得到片子完整良好，而且没有气泡，可在冰箱中保持数日。也可以制成永久片，步骤如下：先剔出封蜡，放入固定液（冰醋酸：酒精=1：3）中，待盖玻片脱落，再把有材料的载玻片和盖玻片通过下列顺序：95%酒精1分钟，纯酒精1分钟，再经纯酒精1分钟，再经过几次不同比例的酒精和二甲苯混合液（3：1；2：1；1：1等），最后到纯二甲苯，取出后用加拿大树胶封片。再取出盖玻片盖上即可。 六 观察标本 1.先用低倍镜观察片子，找到好的染色体图像 后，放到视野中心，再用高倍镜观察。 2.黑腹果蝇的唾腺染色体是2n=2×4=8（图）, 但因体细胞配对，又因短小的第4染色体和X染色 体的着丝粒在端部，所以染色体的一端在染色中 心上，看上去，各自只形成一条线状和点状染色 体。只有第2和第3染色体的着丝粒在中央，它们 从染色体以V字形向外伸出（2L,2R,3L,3R）,因 此共有6条。 在显微镜下，短小的第4染色体有时不易观察 到。雄果蝇的Y染色 体几乎包含在染色中心里，因为是异染色质,看 起来染色可能淡些。有经验的人可以发现雄果蝇 的X染色体要细些，因为雄体只有一条X染色体。 3.唾腺染色体上的横纹宽窄、浓淡是一定的， 但在果蝇的特定发育时期，它们会出现不连续的 膨胀，这称为疏松区（puff），目前人们认为这 是这部分基因被激活的标志。 返回 * * * * * *