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第三讲rna转录后的加工1
帽子结构功能: ①能被核糖体小亚基识别,促使mRNA和核糖体的结合,提高翻译效率; ②m7Gppp结构能有效地封闭mRNA 5’末端,以保护mRNA免受5’核酸外切酶的降解,增强mRNA的稳定。 2、mRNA 3’端的加尾时间: 4、mRNA poly(A)尾功能: A、防止mRNA降解,大大提高了mRNA在细胞质中的稳定性。 B、是mRNA穿越核膜由细胞核进入细胞质的必需形式。 C、与翻译有关:切除poly(A)尾会影响翻译起始。 (四)、RNA的剪接 三、原核生物与真核生物mRNA的特征比较 1、原核生物mRNA的特征 ● 半衰期短 ● 多以多顺反子的形式存在 2、真核生物mRNA的特征 原核生物和真核生物mRNA结构的比较 四、RNA合成与DNA合成的异同点 相同点: 1、都以DNA链作为模板 2、合成的方向均为5’→3’ 3、聚合反应均是通过核苷酸之间形成的3’,5’磷酸 二酯键,使核苷酸链延长。 不同点: 6) 、 反式剪接 (trans-splicing) ● 以一条pre-RNA 为底物 以两条不同来源的pre-RNA 为底物 ● 在spliceosome中完成 在spliceosome中完成 ● 组成型剪接 在成熟RNA的leading sequence处或选择性剪接 拼接一外来的35Nt的spliced lead (对供点或受点的识别差异) (SL, 剪接引导序列) 或 mini-exon cis-splicing tans-splicing ● lariat intron Y- intron A、反式剪接的发现与证实 锥虫 可变表面糖蛋白(VGS)基因中发现(Van de Ploeg 1982) ● 锥虫中几乎所有mRNA的5’-end 均有相同的 35Nt seq. (mini-exon) ● mature mRNA 35Nt外来RNA VGS 5’ ● 锥虫genome中发现 包含有35Nt seq.在内的135Nt的重复序列 (约200个拷贝) ● 病毒 线虫 植物 (mt, ct) 人体 5’---tgaactAANNCNNNNNNNNCAGTTTCTGTACTNNATTGgta--3’ P 35Nt mini-exon consensus intron 均有发现 High conservative ● Splicing Model: --- Group III pre-mRNA中AUG上游(lead seq.)30-70Nt 存在通用方式剪接的受点(3’ AG) pre-mRNA的AUG上游序列中的一个A 2’-OH对SL序列内含子中供点的G发动攻击,发生转酯反应,与 SL 中供点的G以2’, 5’磷酸酯键连接,并生成游离的前导序列。 游离的前导序列3‘-OH攻击受点(3’ AG) 形成Y-intron 和成熟的mRNA。 锥虫的反式剪接方式 A A A 7)、酵母tRNA 的剪接与成熟 在400 个左右的酵母tRNA 基因中,有40 个割裂基因,均只含有一个内含子,位于反密码子环3¢端,长度在14-16bp 之间。 A、酵母tRNA的结构特点: 在所有的酵母tRNA内含子中,并没有发现可被剪接酶识别的保守序列。 所有酵母tRNA的内含子中都含有一段与反密码子环互补的序列。 酵母苯丙氨酰tRNA前体中的一个内含子可以与反密码环配对,从而改变了反密码臂的结构。此RNA 前体内含子环与“茎”上一个受排挤碱基的配对可能是剪接所必需的。 酵母tRNA前体的结构 B、剪接的过程: 第一步:不需要ATP。由一种内切酶切断外显子和内含子交界处的磷酸二酯键。切割产物是一个线性的内含子和两个tRNA半分子。这些中间体都有独特
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